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ELISA試劑盒免疫吸附實(shí)驗(yàn)直接法和間接法優(yōu)缺點(diǎn)

時間:2016-10-10閱讀:2935
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ELISA試劑盒免疫吸附實(shí)驗(yàn)直接法和間接法優(yōu)缺點(diǎn)
因?yàn)镋LISA酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)具有快速、靈敏、簡便、載體易于標(biāo)準(zhǔn)化等優(yōu)點(diǎn)。已成為分析化學(xué)領(lǐng)域中的前沿課題 ,它是一種特殊的試劑分析方法。
ELISA試劑盒可用于測定抗原,也可用于測定抗體。在這種測定方法中有三個必要的試劑:
(1)固相的抗菌素原或抗體,即"免疫吸附劑"(immunosorbent);
(2)酶標(biāo)記的抗原或抗體,稱為"結(jié)合物"(conjugate);
(3)酶反應(yīng)的底物。根據(jù)試劑的來源和標(biāo)本的情況以及檢測的具體條件,可設(shè)計(jì)出各種不類型的檢測方法。
直接法(direct elisa)將抗原直接固定在固相載體上,加入酶標(biāo)記的一級抗體,即可測定抗原總量,此一級抗體的特異性非常重要。
優(yōu)勢:二抗可以加強(qiáng)信號,而且有多種選擇能做不同的測定分析。不加酶標(biāo)記的一級抗體則能保留它zui多的免疫反應(yīng)性。
缺點(diǎn):交互反應(yīng)發(fā)生的機(jī)率較高。
間接法(indirect elisa)
ELISA試劑盒可根據(jù)抗原抗體的結(jié)合情況來分類為以下兩種方法。
此測定方法與直接法類似,差別在于一級抗體沒有酶標(biāo)記,改用酶標(biāo)記的二級抗體去辨識一級抗體來測定抗原量。
優(yōu)勢:操作手續(xù)簡短,因無須使用二抗可避免交互反應(yīng)。
缺點(diǎn):試驗(yàn)中的一抗都得用酶標(biāo)記,但不是每種抗體都適合做標(biāo)記,費(fèi)用相對提高。

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