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ELISA捕獲包被法檢測(cè)抗體原理

時(shí)間:2020-7-6閱讀:7284
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做試驗(yàn)的時(shí)分你知道ELISA捕獲包被法檢測(cè)抗體原理和進(jìn)程嗎,上海紀(jì)寧實(shí)業(yè)有限公司來(lái)奉告你。


    一、原理
    捕獲包被法(亦稱反向間接法)ELISA,首要用于血清中某種抗體亞型成分(如IgM)的測(cè)定。以現(xiàn)在常用的IgM測(cè)定為例,因血清中針對(duì)某種抗原的特異性IgM和IgG一起存在,則后者可煩擾IgM的測(cè)定。因此先將全部血清IgM(包含異性IgM和非特異性IgM)固定在固相上,在去除IgG后再測(cè)定特異性IgM。IgM抗體的檢測(cè)用于盛行癥的前期確診中。先用抗人IgM抗體包被固相,以捕獲血清標(biāo)本中的IgM(其中包含針對(duì)抗原的特異性IgM抗體和非特異性的IgM)。然后參與抗原,此抗原僅與特異性IgM相結(jié)合。繼而加酶符號(hào)針對(duì)抗原的特異性抗體。再與底物作用,呈色即與標(biāo)本中的IgM成正相關(guān)。此法常用于病毒性感染的前期確診。類風(fēng)濕因子(RF)相同能煩擾捕獲包被法測(cè)定IgM抗體,導(dǎo)致假陽(yáng)性反響。因此中和IgG的間接法近來(lái)頗受喜愛(ài),用這類試劑檢測(cè)抗CMV IgGM和抗弓形蟲(chóng)IgM抗體已獲成功。


    捕獲法測(cè)抗體的簡(jiǎn)明操作進(jìn)程:
   1.特異性捕獲抗體的包被,先把能特異性結(jié)合待測(cè)抗原的抗體固定于固相載體外表;

   2.參與待測(cè)樣品,經(jīng)過(guò)固定在載體外表的針對(duì)該抗原的抗體固定于載體外表;

   3.參與特異性抗原以及針對(duì)該特異性抗原的酶標(biāo)抗體;

   4.參與酶促反響底物,發(fā)生顯色反響,顯色的深淺與待測(cè)抗體的量成正比。


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