NAD-蘋果酸酶(NAD-ME)測試盒(輔酶Ⅱ系列)
測定方法：分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格：50管/48樣
注 意：正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義：
ME廣泛存在于微生物、培養(yǎng)細胞、動物和植物胞漿中，尤其在植物組織中活性較高。ME催化蘋果酸氧化脫羧的可逆反應，產(chǎn)生丙酮酸和CO2，以及伴隨NAD(P)+的還原反應，是蘋果酸代謝的關鍵酶。ME活性與生物合成和抗氧化密切相關。近年來植物ME活性測定較多，已經(jīng)成為抗氧化研究的熱點。根據(jù)輔酶專一性和對底物特異性的不同，可將ME分為NAD-ME(EC1.1.1.38)和NADP-ME(EC1.1.1.40)。
NAD-蘋果酸酶(NAD-ME)測試盒(輔酶Ⅱ系列)
測定原理：
NAD-ME催化NAD+還原成NADH，在340nm下測定NADH增加速率。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿和蒸餾水。
試劑的組成和配制：
提取液：60mL×1瓶，4℃保存。；
試劑一：液體40mL×1瓶，4℃保存；
試劑二：液體20mL×1瓶，4℃保存；
試劑三：粉劑×1支，4℃保存；用時加2mL蒸餾水充分溶解備用；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復凍融。
試劑四：粉劑×1支，-20℃保存；用時加1mL蒸餾水充分溶解備用；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復凍融。
樣本的前處理：
1、細菌、細胞或組織樣品的制備：
細菌或培養(yǎng)細胞：先收集細菌或細胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細菌或細胞數(shù)量（104個）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1mL提取液），超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次）；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液），進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
2、血清（漿）樣品：直接檢測。
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