谷胱γ谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶γ-GT測定測試盒微量法
測定方法:微量法
產(chǎn)品規(guī)格:100管/96樣
注 意:正式測定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。
測定意義:
γ-GT是γ-谷氨酰循環(huán)中的關(guān)鍵酶,催化GSH降解。γ-GT催化GSH或者其他γ-谷氨?;衔锷系摩?谷氨?;D(zhuǎn)移到受體。也可以催化GSH和其他γ-谷氨?;衔锏乃猓a(chǎn)生Glu鹽,在細(xì)胞外(GSH)新陳代謝中起了重要的作用。
谷胱γ谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶γ-GT測定測試盒微量法
測定原理:
γ-GT催化谷氨酰對硝基苯胺中γ-谷氨?;D(zhuǎn)移給N-甘氨酰Gly,生成對硝基苯胺,在405nm有特征光吸收;通過測定405nm光吸收增加速率,來計(jì)算γ-GT酶活性。
自備儀器和用品:
低溫離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)節(jié)移液器、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96孔板、和蒸餾水
試劑組成和配制:
試劑一:液體100mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:粉劑×1瓶,4℃保存。
試劑三:液體4mL×1瓶,4℃保存。
試劑四:液體14.8mL×1瓶,4℃保存。
工作液(在試劑二瓶中配制):臨用前配制,把試劑三倒入試劑二瓶中,充分溶解(室溫過低時(shí)可以40℃水浴促進(jìn)溶解);然后把試劑四倒入試劑二瓶中,混勻后室溫保存。
粗酶液提?。?br/>
1.組織:按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進(jìn)行冰浴勻漿。8000g,4℃離心15min,取上清,置冰上待測。
2.細(xì)菌、真菌:按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)胞加入1mL試劑一),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時(shí)間3min);然后8000g,4℃,離心15min,取上清置于冰上待測。
3. 血清等液體:直接測定。