微量法_海藻糖酶測(cè)試盒
測(cè)定方法：微量法
產(chǎn)品規(guī)格：100管/48樣
注 意：正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定
測(cè)定意義：
THL（EC 3.2.1.28）廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中。海藻糖酶主要功能在于生物體分解海藻糖生成葡萄糖而直接用于能量供應(yīng)。
測(cè)定原理：
THL 催化海藻糖產(chǎn)生葡萄糖，葡萄糖氧化酶催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸，并產(chǎn)生過(guò)氧化氫；過(guò)氧化物酶催化過(guò)氧化氫氧化 4-氨基安替-比林偶聯(lián)酚，生成有色化合物，在 505 nm 有特征吸收峰，以此反映 THL 活性。
微量法_海藻糖酶測(cè)試盒
需自備的儀器和用品：
可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制：
提取液：液體 50mL×1 瓶，4℃保存；
試劑一：液體 6mL×1 瓶，4℃保存；
試劑二：液體 10ml×1 瓶，4℃保存；
試劑三：液體 10ml×1 瓶，4℃保存；（若出現(xiàn)結(jié)冰現(xiàn)象，可 37℃水浴溶解后使用）
樣品測(cè)定的準(zhǔn)備：
1、細(xì)菌或細(xì)胞的處理：收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104 個(gè)）：提取液體積（mL）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液），超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率 20％或 200W，超聲 3S，間隔 10S，重復(fù) 30 次）；8000g，4℃離心 10min，取上清，置冰上待測(cè)。
2、組織的處理：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱(chēng)取約 0.1g 組織，加入 1mL 提取液），冰浴中勻漿。8000g ，4℃離心 10min，取上清，置冰上待測(cè)。
3、血清（漿）的處理：按照血清（漿）體積（mL）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議取 0.1mL 血清（漿）加入 1mL 提取液），冰浴中勻漿。8000g ，4℃離心 10min，取上清，置冰上待測(cè)。
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