蛋白酶系列_胃蛋-白酶(Pepsin)測試盒
測定方法：微量法
產(chǎn)品規(guī)格：100管/48樣
注 意：正式測定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。
測定意義：
胃蛋-白酶由胃粘膜主細(xì)胞分泌，分解食物中蛋白質(zhì)成小肽段。一般用于神經(jīng)性低酸癥的鑒別，慢性胃炎、慢性胃擴(kuò)張、慢性十二指腸炎等癥狀時(shí)也會引起胃蛋-白酶分泌的減少。
蛋白酶系列_胃蛋-白酶(Pepsin)測試盒
測定原理：
胃蛋-白酶可催化血紅蛋白水解，水解產(chǎn)物與福林試劑反應(yīng)后顯藍(lán)色；一定范圍內(nèi)，其顏色的深淺與胃蛋-白酶活性呈正比。
自備儀器和用品：
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96孔板、臺式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、研缽、冰和蒸餾水。
試劑組成和配制：
試劑一：液體100mL×1瓶，4℃保存。
試劑二：液體20mL×1瓶，4℃保存。
試劑三：粉劑×1瓶，4℃避光保存。臨用前加入10mL試劑二充分溶解。
試劑四：粉劑×1瓶，4℃保存。臨用前加入10mL蒸餾水充分溶解。
試劑五：粉劑×1瓶，4℃保存。臨用前加入15mL蒸餾水充分溶解。
試劑六：液體3.3mL×1瓶，4℃保存。
標(biāo)準(zhǔn)品：液體1.27mL×1支，0.5μmol/mL酪-氨酸標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度4℃保存。
粗酶液提取：
組織樣品：按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL試劑一）冰浴勻漿，8000g，4℃離心10min，取上清，即粗酶液。
測定步驟：
1.分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min，調(diào)節(jié)波長到580 nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑三和試劑四置于37℃水浴預(yù)熱30min。
3. 標(biāo)準(zhǔn)管：取微量玻璃比色皿/96孔板，加入20μL標(biāo)準(zhǔn)品，40μL試劑二，120μL試劑五，20μL試劑六，混勻后室溫靜置20min，于580 nm測光吸收，記為A標(biāo)準(zhǔn)管。
4. 空白管：取微量玻璃比色皿/96孔板，加入20μL蒸餾水，40μL試劑二，120μL試劑五，20μL試劑六，混勻后室溫靜置20min，于 580 nm測光吸收，記為A標(biāo)準(zhǔn)空白管。
5. 對照管：取 EP管，加入100 μL蒸餾水，置于37℃水浴保溫10min；加入100μL試劑四，蓋緊后搖勻1min；加入20μL粗酶液，混勻后8000g 4℃離心10分鐘取上清；在微量玻璃比色皿/96孔板加入上清液20μL，再加入40μL試劑二，120μL試劑五，20μL試劑六，混勻后室溫靜置20min，于580 nm測光吸收，記為A空白管。
6. 測定管：取 EP管，加入20μL粗酶液，100μL試劑三，置于37℃水浴保溫10min；加入100μL試劑四，
蓋緊后搖勻1min；8000g 4℃離心10分鐘取上清；在微量玻璃比色皿/96孔板加入上清液20μL，再加入40μL試劑二，120μL試劑五，20μL試劑六，混勻后室溫靜置20min，于 580 nm測光吸收，記為A測定管。
注意：空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需要測定一次。
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