微量法-過(guò)氧化氫酶CAT測(cè)試盒(鉬酸銨比色法)
測(cè)定方法：微量法
產(chǎn)品規(guī)格：100管/96樣
測(cè)定意義：
CAT(EC 1.11.1.6)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，是主要的 H2O2 清除酶，在活性氧清除系統(tǒng)中具有重要作用。
微量法-過(guò)氧化氫酶CAT測(cè)試盒(鉬酸銨比色法)
測(cè)定原理：
過(guò)氧化氫能氧化 MoO42-成 MoO52-,MoO52-接受氫氧根的電子成鍵，分子間立即脫水縮合，得到穩(wěn)定的復(fù)合物(H2MoO4·XH2O)n 在 405nm 處有強(qiáng)烈吸收峰，其吸光值和過(guò)氧化氫濃度成線性關(guān)系。測(cè)定出體系剩余過(guò)氧化氫在 405nm 的吸光值即可反映 CAT 的催化活性。
需自備的儀器和用品：酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、96 孔板、研缽、冰和蒸餾水
試劑組成和配制：
提取液：液體 100 mL×1 瓶，4℃保存；
試劑一：液體 5 mL×1 瓶，4℃避光保存；
試劑二：液體 15 mL×1 瓶，常溫保存；（過(guò)飽和試劑，如有結(jié)晶析出，可 37℃加熱攪拌溶解）試劑三：液體 30 mL×1 瓶，4℃保存；(過(guò)飽和試劑，如有絮狀沉淀，可 37℃加熱攪拌溶解)
粗酶液提?。?br/>
1、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備：
細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104 個(gè)）：提取液體積（mL）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液），超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率 20％或 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復(fù) 30 次）； 8000g 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測(cè)。
組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織，加入 1mL 提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測(cè)。
2、血清（漿）樣品：直接檢測(cè)。
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