非蛋白質(zhì)巰基測試盒_氧化與抗氧化系列
測定方法：分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格：50管/24樣
注 意：正式測定之前選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。
測定意義：
生物體內(nèi)巰基主要包括非蛋白質(zhì)巰基和蛋白質(zhì)巰基。巰基化合物在體內(nèi)具有重要的解毒功能，對生物體的自我調(diào)節(jié)具有非常重要的生理意義。
非蛋白質(zhì)巰基測試盒_氧化與抗氧化系列
測定原理：
巰基基團(tuán)與5,5’- 二硫代-雙-硝基苯甲酸（DTNB）反應(yīng)，生成化合物，在412nm處有大吸收峰。
自備實驗用品：
天平、研缽、可見分光光度計、恒溫水浴鍋、1mL玻璃比色皿、乙醇和蒸餾水。
試劑組成和配制：
提取液：液體50 mL×1瓶，4℃保存。
試劑一：液體40 mL×1瓶，4℃保存。
試劑二：液體2mL×1瓶，4℃避光保存。
樣品的制備：
1.按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液）進(jìn)行冰浴勻漿，然后8000g，4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
2.血清，培養(yǎng)液：取0.1mL樣本，加入0.4mL提取液，混勻，室溫靜置10min, 然后8000g，4℃離心10min，
3.取上清，置冰上待測。
計算公式：
非蛋白巰基標(biāo)準(zhǔn)曲線：y =3.6222 x- 0.0037，R2 = 1，x為標(biāo)品濃度，單位μmol/mL， y為吸光度ΔA。
1. 組織：
（1）按樣本重量計算
非蛋白巰基含量（μmol/g 鮮重）=（ΔA+0.0037）÷3.6222 ×V樣總÷W
=0.276×（ΔA+0.0037）÷W
（2）按樣本蛋白濃度計算
非
蛋白巰基含量（μmol/mg prot）=（ΔA+0.0037）÷3.6222×V樣總÷Cpr
=0.276×（ΔA+0.0037）÷Cpr
2. 血清、培養(yǎng)液：
非蛋白巰基含量（μmol/L）=（ΔA+0.0037）÷3.6222×5 ×103
=1380×（ΔA+0.0037）
V樣總：加入提取液體積，1mL；W：樣品質(zhì)量，g ；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL；5：血清，培養(yǎng)液等液體樣本稀釋倍數(shù)；103 ：1mmol/L=103μmol/ L
環(huán)保在線