超氧陰離子清除能力測試盒_氧化與抗氧化
測定方法:分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣
注 意:正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。
測定意義:
超氧陰離子自由基作為生物體代謝過程中產(chǎn)生的一種自由基,可攻擊生物大分子,如脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、核酸和聚不飽和脂肪酸等,使其交鏈或者斷裂,引起細胞結(jié)構(gòu)和功能的破壞,與機體衰老和病變有很密切的關(guān)系,清除超氧陰離子自由基的研究已經(jīng)得到了廣泛的關(guān)注。
超氧陰離子清除能力測試盒_氧化與抗氧化
測定原理:
AP-TEMED系統(tǒng)產(chǎn)生超氧陰離子,與鹽酸羥胺反應生成NO2-,NO2-與對氨基苯磺酸和α-萘胺的作用生成紅色的偶氮化合物,在530nm處有特征吸收峰,樣品對超氧陰離子的清除能力與530nm的吸光值呈負相關(guān)。
自備實驗用品及儀器:
天平、研缽、低溫離心機、可見分光光度計、1 mL玻璃比色皿、恒溫水浴鍋。
試劑組成和配制:
提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:液體3mL×1瓶,4℃避光保存。
試劑二:粉劑×1瓶,4℃避光保存。臨用前加12mL蒸餾水充分溶解。
試劑三:液體15mL×1瓶,4℃保存。
試劑四:液體15mL×1瓶,4℃避光保存。
試劑五:液體15mL×1瓶,4℃避光保存。
樣品處理:
1.組織:按照質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g,加入1mL提取液)加入提取液,冰浴勻漿后于4℃,10000g離心10min,取上清置于冰上待測。
2.細胞:按照細胞數(shù)量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1mL提取液),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);然后4℃,10000g離心10min,取上清置于冰上待測。
3.培養(yǎng)液或其它液體:直接檢測。
4.粉劑藥物可配制成相同濃度,比如1mg/mL。