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上海酶聯(lián)生物研究所

細(xì)胞培育如何選擇血清

時(shí)間:2017-8-1閱讀:339
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從前常常聽到有人問,這種細(xì)胞該用哪一種培養(yǎng)基呢?本來這個(gè)疑問的答案能夠很簡(jiǎn)單,也能夠很雜亂。假如這種細(xì)胞是購(gòu)自ATCC或別的的細(xì)胞庫(kù),那很簡(jiǎn)單,問供貨商就行了?;騾⒖从嘘P(guān)的文獻(xiàn)。Invitrogen上有一個(gè)Cell Line Database的東西,也很好用。選擇你感興趣的細(xì)胞類型,它就會(huì)顯現(xiàn)相應(yīng)的培養(yǎng)基、血清和轉(zhuǎn)染試劑等,有時(shí)還有優(yōu)化好的轉(zhuǎn)染進(jìn)程,很方便。Sigma上也有一個(gè)Media Expert,包含培養(yǎng)基全部成分的功用描寫、運(yùn)用推介和參看文獻(xiàn)等,它仍是一個(gè)處理問題的能手,對(duì)于細(xì)胞培養(yǎng)中的常見疑問,如細(xì)胞貼壁欠好、培養(yǎng)基變色等,它都會(huì)列出相應(yīng)的因素,并供給處理的方法。

假如你是預(yù)備建立一種全新細(xì)胞的培養(yǎng)體系,并且找不到任何參看,那你就得花時(shí)刻自個(gè)實(shí)驗(yàn)了。在MEM中培養(yǎng)的細(xì)胞,很能夠在DMEM或M199中生長(zhǎng)。總歸,MEM做貼壁細(xì)胞培養(yǎng)、RPMI 1640做懸浮細(xì)胞培養(yǎng)是一個(gè)好的開始。你也能夠采購(gòu)多種培養(yǎng)基,然后花大約兩周的時(shí)刻先做一個(gè)對(duì)比簡(jiǎn)單的細(xì)胞生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn),然后從中選擇zui合適的。

曾經(jīng)大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室都是用干粉培養(yǎng)基,可是制造的過程對(duì)比費(fèi)事,需要溶解、調(diào)理pH值,過濾,在此過程中還會(huì)發(fā)作濃度差錯(cuò),并且有些實(shí)驗(yàn)室的水質(zhì)并不志向,所以培養(yǎng)的作用會(huì)有不同。假如運(yùn)用液體培養(yǎng)基,這種人為的差錯(cuò)會(huì)下降。也許你會(huì)覺得液體培養(yǎng)基對(duì)比貴,曾經(jīng)是這么,可是現(xiàn)在不一樣了。HyClone和Invitrogen都在國(guó)內(nèi)建立了液體培養(yǎng)基的生產(chǎn)基地,生產(chǎn)和運(yùn)送的本錢大大下降,所以現(xiàn)在的報(bào)價(jià)也對(duì)比廉價(jià),比干粉培養(yǎng)基貴不了多少,并且還幫你省了過濾器和時(shí)刻。

血清富含生長(zhǎng)因子,能夠推動(dòng)細(xì)胞的繁殖,富含的附著因子可推動(dòng)細(xì)胞的貼壁,一同還具有抗*活性。血清也是礦物質(zhì)、脂類及激素的重要來歷。zui常用的血清有小牛血清、重生牛血清、胎牛血清和馬血清等。牛血清是依照采血時(shí)刻的早晚來分類的。采血時(shí)刻越早,營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)越豐厚,所含抗體也越少,因而胎牛血清合適需要高的細(xì)胞系和克隆化培養(yǎng)。因?yàn)榀偱2〉囊蛩兀侥壳盀橹?,中?guó)政府仍然制止從北美洲、歐洲和日本等區(qū)域進(jìn)口牛血清,因而國(guó)內(nèi)市面上的牛血清大多來自澳洲、南美洲,或是國(guó)產(chǎn)的。

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