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上海酶聯(lián)生物研究所

免疫組化的常用方法

時間:2017-8-1閱讀:241
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現(xiàn)在幾種常用免疫組化辦法簡略介紹 
 
1)免疫熒光辦法
是zui早樹立的免疫安排化學(xué)技能。它運用抗原抗體特異性的原理,先將已知抗體標(biāo)上熒光素,以此作為探針查看細(xì)胞或安排內(nèi)的相應(yīng)抗原,在熒光顯微鏡下調(diào)查。當(dāng)抗原抗體復(fù)合物中的熒光素受激發(fā)光的照射后即會宣布必定波長的熒光,然后可確定安排中某種抗原的定位,進(jìn)而還可進(jìn)行定量分析。因為免疫熒光技能特異性強、靈敏度高、快速簡潔,所以在臨床病理確診、查驗中運用較廣。 
 
2)免疫酶標(biāo)辦法
免疫酶標(biāo)辦法是繼免疫熒光后,于 60 年代發(fā)展起來的技能?;驹硎窍纫悦阜柕目贵w與安排或細(xì)胞效果,然后參加酶的底物,生成有色的不溶性產(chǎn)物或具有必定電子密度的顆粒,經(jīng)過光鏡或電鏡,對細(xì)胞表面和細(xì)胞內(nèi)的各種抗原成分進(jìn)行定位研討。免疫酶標(biāo)技能是現(xiàn)在zui常用的技能。 本辦法與免疫熒光技能比較的首要長處是:定位,對比度好,染色標(biāo)本可長時間保留,合適于光、電鏡研討等。 免疫酶標(biāo)辦法的發(fā)展非常敏捷,現(xiàn)已衍生出了多種符號辦法,且跟著辦法的不斷改進(jìn)和立異,其特異性和靈敏度都在不斷提高,運用也越來越便利?,F(xiàn)在在病理確診中廣為運用的有 ABC 法、SP 三步法、即用型二步法檢測體系等。 
 
3)免疫膠體金技能
免疫膠體金技能是以膠體金這么一種特殊的金屬顆粒作為符號物。膠體金是指金的水溶膠,它能敏捷而穩(wěn)定地吸附蛋白,對蛋白的生物學(xué)活性則沒有顯著的影響。因而,用膠體金符號一抗、二抗或別的能特異性免疫球蛋白的分子(如葡萄球菌 A 蛋白)等作為探針,就能對安排或細(xì)胞內(nèi)的抗原進(jìn)行定性、定位,乃至定量研討。因為膠體金有不一樣巨細(xì)的顆粒,且膠體金的電子密度高,所以免疫膠體金技能格外合適于免疫電鏡的單符號或多符號定位研討。因為膠體金自身呈淡至深赤色,因而也合適進(jìn)行光鏡調(diào)查。如運用銀加強的免疫金銀規(guī)律更便于光鏡調(diào)查。

 

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