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上海一研生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第11年

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ELISA臨床質(zhì)量評(píng)價(jià)管理

時(shí)間:2016/12/6閱讀:1461
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ELISA臨床質(zhì)量評(píng)價(jià)管理

分析前質(zhì)控 
●人員培訓(xùn)實(shí)驗(yàn)是人操作的,因此檢驗(yàn)人員需經(jīng)過(guò)培訓(xùn),熟練掌握本專業(yè)如下幾方面的技術(shù)知識(shí): 
◎檢驗(yàn)項(xiàng)目的基本原理(ELISA 原理); 
◎臨床意義; 
◎熟悉檢測(cè)技巧,了解易出差錯(cuò)的環(huán)節(jié)及難點(diǎn); 
◎熟悉檢測(cè)試劑性能(包括試劑盒組成,包被片段及其組成); 
◎ 熟悉檢測(cè)儀器的原理及性能;掌握數(shù)據(jù)處理的能力和質(zhì)量控制知識(shí)。 
◎某些特殊項(xiàng)目的檢測(cè)如抗HIV 等需經(jīng)有關(guān)部門組織的專門培訓(xùn)班,考試合格后持證上崗。 
分析前質(zhì)控 
ELISA 原理:1971 年Engvall 等人把免疫組化的EIA 技術(shù)應(yīng)用于臨床檢驗(yàn)發(fā)展為ELISA 技術(shù)。 
特點(diǎn):在固相表面組裝免疫活性物質(zhì)形成"免疫吸附劑" 
酶標(biāo)記免疫活性物質(zhì),進(jìn)行信號(hào)放大; 
有二步溫育反應(yīng)二次洗滌過(guò)程; 
靈敏度特異性相對(duì)較高。 
局限性:只能檢測(cè)到ng 水平 
精密度差(批內(nèi)CV15-20%); 
線性范圍窄(一個(gè)數(shù)量級(jí)); 
存在"HD-HOOK" 效應(yīng)。

ELISA 原理

●根據(jù)檢測(cè)目的和操作步驟不同有三種基本方法。 
●雙抗體(原)夾心法檢測(cè)抗原(體)的常見方法,應(yīng)用針對(duì)抗原兩個(gè)不同決定族的兩種單抗分別作為固相載體和酶標(biāo)抗體檢測(cè)溶液中的抗原(適用于二價(jià)以上抗原,不能測(cè)小分子半抗原)。 
●間接法檢測(cè)抗體的方法,利用酶標(biāo)記的抗抗體(第二抗體)檢測(cè)已與固相抗原結(jié)合的抗體。 
●競(jìng)爭(zhēng)法檢測(cè)抗原或小分子半抗原、抗體,以測(cè)抗原為例,使待測(cè)抗原和酶標(biāo)抗原競(jìng)爭(zhēng)與固相抗體結(jié)合,結(jié)果如待測(cè)抗原含量越多,與固相抗體結(jié)合的酶標(biāo)抗原就越少,顯色越淺,二者呈負(fù)相關(guān)。

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