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ELISA臨床質(zhì)量評(píng)價(jià)管理

時(shí)間：2016/12/6閱讀：1480

ELISA臨床質(zhì)量評(píng)價(jià)管理

分析前質(zhì)控
●人員培訓(xùn)實(shí)驗(yàn)是人操作的，因此檢驗(yàn)人員需經(jīng)過(guò)培訓(xùn)，熟練掌握本專業(yè)如下幾方面的技術(shù)知識(shí)：
◎檢驗(yàn)項(xiàng)目的基本原理（ELISA 原理）；
◎臨床意義；
◎熟悉檢測(cè)技巧，了解易出差錯(cuò)的環(huán)節(jié)及難點(diǎn)；
◎熟悉檢測(cè)試劑性能（包括試劑盒組成，包被片段及其組成）；
◎ 熟悉檢測(cè)儀器的原理及性能；掌握數(shù)據(jù)處理的能力和質(zhì)量控制知識(shí)。
◎某些特殊項(xiàng)目的檢測(cè)如抗HIV 等需經(jīng)有關(guān)部門組織的專門培訓(xùn)班，考試合格后持證上崗。
分析前質(zhì)控
◎ELISA 原理：1971 年Engvall 等人把免疫組化的EIA 技術(shù)應(yīng)用于臨床檢驗(yàn)發(fā)展為ELISA 技術(shù)。
特點(diǎn)：在固相表面組裝免疫活性物質(zhì)形成"免疫吸附劑"
酶標(biāo)記免疫活性物質(zhì)，進(jìn)行信號(hào)放大；
有二步溫育反應(yīng)二次洗滌過(guò)程；
靈敏度特異性相對(duì)較高。
局限性：只能檢測(cè)到ng 水平
精密度差（批內(nèi)CV15-20%）；
線性范圍窄（一個(gè)數(shù)量級(jí)）；
存在"HD-HOOK" 效應(yīng)。

ELISA 原理

●根據(jù)檢測(cè)目的和操作步驟不同有三種基本方法。
●雙抗體（原）夾心法檢測(cè)抗原（體）的常見方法，應(yīng)用針對(duì)抗原兩個(gè)不同決定族的兩種單抗分別作為固相載體和酶標(biāo)抗體檢測(cè)溶液中的抗原（適用于二價(jià)以上抗原,不能測(cè)小分子半抗原）。
●間接法檢測(cè)抗體的方法，利用酶標(biāo)記的抗抗體（第二抗體）檢測(cè)已與固相抗原結(jié)合的抗體。
●競(jìng)爭(zhēng)法檢測(cè)抗原或小分子半抗原、抗體，以測(cè)抗原為例，使待測(cè)抗原和酶標(biāo)抗原競(jìng)爭(zhēng)與固相抗體結(jié)合，結(jié)果如待測(cè)抗原含量越多，與固相抗體結(jié)合的酶標(biāo)抗原就越少，顯色越淺，二者呈負(fù)相關(guān)。

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