到底elisa試劑盒原理是什么？
免疫測定技術(shù)的基礎(chǔ)在于抗原抗體之間的特異結(jié)合反應(yīng),所以任何的診斷試劑離不開的原料,如抗原抗體,酶等。以前用于免疫測定的抗原通常為各種純化抗原,而抗體則為純化抗原免疫動物后獲得的多克隆抗體和使用雜交瘤技術(shù)得到的單克隆抗體,而抗原或抗體的標(biāo)記物如酶標(biāo)結(jié)合物則通過各種化學(xué)合成方法制備。近年來,隨著分子生物學(xué)的發(fā)展,使用基因工程方法制備各種特殊的抗原或抗體及其酶結(jié)合物等免疫測定試劑幾成為現(xiàn)實的新一代試劑,各種新型使用的測定方法也不斷出現(xiàn)。HBsAg試劑特點（檢測模式：臨床抗體夾心法）：包被抗體為山羊多抗。多抗具有高親和性和對抗原各種表位的反應(yīng)性。酶表抗體為與HBsAg有不同結(jié)合位點的鼠復(fù)合單位,可測得HBsAg變異樣品,提高檢測的特異性（99。98%）提高檢測的靈敏度,應(yīng)用Parl Ehrich 學(xué)說（PEI）HBsAg標(biāo)準(zhǔn)品,對ad標(biāo)準(zhǔn)品的靈敏度為0。05ng/ml對ay標(biāo)準(zhǔn)品靈敏度為0。025ng/mlELISA檢測試劑盒應(yīng)用定性夾心免疫檢測技術(shù),用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板條,這些多肽是中國型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很強的肽段,分別來自于該毒株的開放閱讀框2和開放閱讀框3。將樣品或標(biāo)準(zhǔn)品加入孔中并孵育,如果其中存在HEV IgM抗體,這些抗體就會與HEV 的多肽抗原結(jié)合,并固定在上面,洗板除去其它非特異性抗體和樣品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP（辣根過氧化物酶）酶結(jié)合物,經(jīng)第二次孵育后,酶結(jié)合物就會與*次孵育結(jié)合上的HEV IgM抗體相結(jié)合,洗板除去未結(jié)合的酶結(jié)合物,加入TMB底物溶液,在第三次孵育時會發(fā)生酶-底物反應(yīng),只有那些含有HEV IgM抗體和酶結(jié)合物所形成的復(fù)合物的孔才會發(fā)生顏色變化,加入硫酸溶液終止酶和底物間的反應(yīng),并在長:450nm處測量O.D。值,按照本HEV IgM抗體elisa試劑盒的測試標(biāo)準(zhǔn),O.D。值大于或等于Cut-Off值的樣品被認為是初試陽性。
操作方法：
雙抗體夾心法：
1、包被：用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1～10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃ 隔夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。（簡稱洗滌，下同）。
2、加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃ 孵育1小時。然后洗滌。（同時做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔）。
3、加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體（經(jīng)滴定后的稀釋度）0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小時，洗滌。
4、加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。
5、終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。
6、結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm（若以ABTS顯色，則410nm）處，以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。
間接法:
1、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃隔夜；
2、次日洗滌3次；
3、加一定稀釋的待檢樣品（未知抗體）0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時,洗滌；
4、（同時做空白、陰性及陽性孔對照）于反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體（抗抗體）0.1ml；
5.37℃孵育35-60分鐘，洗滌；
6、zui后一遍用DDW洗滌。
其余步驟同“雙抗體夾心法”的4、5、6。
優(yōu)勢試劑*：
人鈣激活*1(CAPN1)ELISA檢測試劑盒
山羊白介素12B(IL12B)ELISA酶免試劑盒
人硫酸雌酮(E1S)ELISA試劑盒使用
人單核細胞增多性李斯特菌素O((LLO)ELISA試劑盒
犬孕酮(P)ELISA試劑盒,96T/48T,KB13743
小鼠鑰孔蟲戚血藍蛋白(KLH)ELISA酶免試劑盒,Mice keyhole limpet hemocyanin (KLH) ELISA kit
鴨病毒性腸炎病毒(DEV)ELISA酶免試劑盒
小鼠絨毛膜*β(β-CG)ELISA試劑盒使用
人甲狀旁腺激素(PTH)ELISA試劑盒,96T/48T,KB12481
山羊轉(zhuǎn)化生長因子β3(TGFβ3)ELISA試劑盒
大鼠D乳酸脫氫酶(DLDH)ELISA試劑盒,96T/48T,KB15764
人孕酮受體(PGR)ELISA試劑盒,96T/48T,KB12077
*(LH)ELISA酶免試劑盒
小鼠骨橋素(OPN)ELISA試劑盒
大鼠膠原酶I(CollagenaseI)ELISA酶免試劑盒
人可溶性CD276分子(sCD276/sB7H3)ELISA酶免試劑盒,Human soluble CD276 molecule (sCD276 / sB7H3) ELISA kit
人叉頭框蛋白01(FoxO1)ELISA試劑盒使用
人E選擇素(E-Selectin/CD62E)ELISA試劑盒
人溴脫氧核苷*(BrdU)ELISA測定試劑盒,96T/48T
人抗*脫羧酶抗體(Anti-GAD)ELISA酶免試劑盒,Human glutamic acid decarboxylase antibody (Anti-GAD) ELISA kit.
兔子Ⅰ型膠原(ColⅠ)ELISA酶免試劑盒
雞免疫球蛋白MELISA測定試劑盒,96T/48T
小鼠16α羥基雌酮1(16-αOHE-1)ELISA檢測試劑盒
人Ⅱ型膠原交聯(lián)C端肽(CTXⅡ)ELISA酶免試劑盒,People Ⅱ collagen cross-linked C-opeptide (CTXⅡ) ELISA kit
牛β乳球蛋白(βLg)ELISA測定試劑盒,96T/48T
小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)ELISA測定試劑盒,96T/48T
人白介素18(IL-18)ELISA試劑盒,96T/48T,KB10711
小鼠P選擇素(P-Selectin/CD62P)ELISA試劑盒使用
山羊補體蛋白3(C3)ELISA檢測試劑盒
兔子*(GSH)ELISA測定試劑盒,96T/48T
大鼠β-防御素(β-Defensins)ELISA酶免試劑盒,Rat βdefensin (β-Defensins) ELISA kit.
牛白介素-12(IL-12)ELISA酶免試劑盒
豬白介素12(IL12)ELISA檢測試劑盒
牛白介素15(IL15)ELISA試劑盒,96T/48T,KB16242
兔抗腦組織抗體(ABAb)ELISA試劑盒使用
猴過氧化氫酶(CAT)ELISA酶免試劑盒,Monkey catalase (CAT) ELISA kit
犬α1微球蛋白(α1MG)ELISA檢測試劑盒
