聯(lián)系電話
上海勁馬實驗設(shè)備有限公司
中級會員·17年
- 聯(lián)系人：
- 馮經(jīng)理
- 電話：
- 021-60521817
- 手機(jī)：
- 13817140470
- 售后：
- 86-021-61107441
- 傳真：
- 86－021－64881400
- 地址：
- 上海市松江區(qū)漕河涇研展路455號B座
- 個性化：
- www.shjmsw.com
- 手機(jī)站：
- m.shjmsw.com
- 網(wǎng)址：
- www.shjmsw.com
掃一掃訪問手機(jī)商鋪
轉(zhuǎn)染方法、原理及應(yīng)用
本文由上海勁馬生物技術(shù)分享，咨詢訂購相關(guān)產(chǎn)品。
DEAE-右旋糖苷法
帶正電的DEAE-右旋糖苷與核酸帶負(fù)電的磷酸骨架相互作用形成的復(fù)合物被細(xì)胞內(nèi)吞 瞬時性轉(zhuǎn)染 相對簡便、結(jié)果可重復(fù)但對細(xì)胞有一定的毒副作用，轉(zhuǎn)染時需除血清。
磷酸鈣法
磷酸鈣DNA復(fù)合物吸附細(xì)胞膜被細(xì)胞內(nèi)吞 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染，瞬時性轉(zhuǎn)染 不適用于原代細(xì)胞，操作簡便但重復(fù)性差，有些細(xì)胞不適用。
電穿孔法
高脈沖電壓破壞細(xì)胞膜電位，DNA通過膜上形成的小孔導(dǎo)入 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染，瞬時性轉(zhuǎn)染，所有細(xì)胞 適用性廣但細(xì)胞致死率高，DNA和細(xì)胞用量大，需根據(jù)不同細(xì)胞類型優(yōu)化電穿孔實驗條件。
陽離子性的脂質(zhì)體法
帶正電的脂質(zhì)體與核酸帶負(fù)電的磷酸基團(tuán)形成復(fù)合物被細(xì)胞內(nèi)吞穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。
瞬時性轉(zhuǎn)染，所有細(xì)胞 適用性廣，轉(zhuǎn)染效率高，重復(fù)性好但轉(zhuǎn)染時需除血清。
轉(zhuǎn)染效果隨細(xì)胞類型變化大
病毒介導(dǎo)法 逆轉(zhuǎn)錄病毒 通過侵染宿主細(xì)胞將外源基因整合到染色體中穩(wěn)定轉(zhuǎn)染，特定宿主細(xì)胞 可用于難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞、原代細(xì)胞，體內(nèi)細(xì)胞等，但攜帶基因不能太大 細(xì)胞需處分裂期，需考慮安全因素 ，腺病毒 瞬時轉(zhuǎn)染，特定宿主細(xì)胞 可用于難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞，需考慮安全因素。
Biolistic 顆粒傳遞法
將DNA用顯微重金屬顆粒沉淀，再將包被好的顆粒用彈道裝置投射入細(xì)胞，DNA在胞內(nèi)逐步釋放，表達(dá)瞬時性轉(zhuǎn)染 可用于：人的表皮細(xì)胞，纖維原細(xì)胞，淋巴細(xì)胞系以及原代細(xì)胞。
顯微注射法
用顯微操作將DNA直接注入靶細(xì)胞核 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染，瞬時性轉(zhuǎn)染 轉(zhuǎn)染細(xì)胞數(shù)有限，多用于工程改造或轉(zhuǎn)基因動物的胚胎細(xì)胞。
