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勁馬提示試劑準(zhǔn)備不當(dāng)容易影響測定結(jié)果

2014-5-13  閱讀(1374)

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  近日有老師來電說Elisa試劑盒實驗測定出的結(jié)果有問題,經(jīng)過我們歐陽技術(shù)的一番探討,并親自實驗測定,原來老師做出來的結(jié)果有問題源自于試劑準(zhǔn)備不因而影響酶聯(lián)免疫吸附測定ELISA結(jié)果

 很多老師在實驗室,對試劑準(zhǔn)備一般不太注意,通常的做法是,在實驗時將試劑從冰箱中拿出來即用,而忽略了這種做法有可能影響后面溫育時間不夠的問題,其直接的后果是對一些弱陽性標(biāo)本的檢測出現(xiàn)假陰性。

因此,歐陽老師提醒大家在ELISA測定中試劑的準(zhǔn)備zui為關(guān)鍵的是,在實驗開始前,將試劑盒先從冰箱中拿出來,在室溫下放置20min以上后,再進行測定,以使試劑盒在使用前與室溫平衡。這樣做的目的,主要是為了在后面的溫育反應(yīng)步驟中,能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達(dá)到所要求的高度,以滿足測定要求。其次,目前的商品ELISA試劑盒中的洗板液均需在實驗室使用時對所提供的濃縮液稀釋配制,因此稀釋時所用的蒸餾水或去離子水應(yīng)保證質(zhì)量。
此外,當(dāng)試劑盒以O(shè)PD為底物時,則底物溶液應(yīng)在反應(yīng)顯色前臨時配制。
勁馬在平臺提出,試劑要注意以下事項,才能保證測定結(jié)果不受影響。
1. 當(dāng)混合蛋白溶液時應(yīng)盡量輕緩,避免起泡。
2. 洗滌過程非常重要,不充分的洗滌易造成假陽性。
3. 一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。
5. 如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高,請先稀釋后再測定,計算時請zui后乘以稀釋倍數(shù)。
6. 在配制標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液工作液時,請以相應(yīng)的稀釋液配制,不能混淆。
7. 底物請避光保存。
8. 不要用其它生產(chǎn)廠家的試劑替換試劑盒中的試劑。

我們承諾,為了節(jié)約您的時間,【ELISA試劑盒】提供免費檢測服務(wù):使用我公司試劑盒,只收取試劑盒的費用,其他輔助試劑全部免費。

 

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