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ELISA實(shí)驗(yàn)標(biāo)本易出的七大問(wèn)題,您知曉多少?

2017-5-25  閱讀(2246)

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   在ELISA實(shí)驗(yàn)檢測(cè)過(guò)程中,標(biāo)本質(zhì)量可以說(shuō)是zui重要的關(guān)鍵因素。如果實(shí)驗(yàn)標(biāo)本質(zhì)量不過(guò)關(guān),即使您的實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)再膩害也無(wú)濟(jì)于事。今天上海勁馬小編就帶大家來(lái)看看在ELISA實(shí)驗(yàn)中,標(biāo)本都容易出現(xiàn)的七大問(wèn)題及解決辦法:

           

1.凝血不充分:
   此類錯(cuò)誤排在*位,主要是抗凝血中存在小凝塊,多發(fā)生在血常規(guī)檢測(cè)中,為采血后標(biāo)本沒(méi)有充分顛倒混勻所致;另外,標(biāo)本量過(guò)多,由于抗凝劑的相對(duì)不足,血漿中出現(xiàn)微血凝塊的可能性增加。微血凝塊除易阻塞檢測(cè)儀器外,由于血液內(nèi)部分成分的消耗而影響檢測(cè)結(jié)果。一份只有仔細(xì)檢查才能發(fā)現(xiàn)小凝塊的標(biāo)本,可以使血小板降低30%甚至更多,紅細(xì)胞、白細(xì)胞計(jì)數(shù)也可以降低10%左右。我們規(guī)定,對(duì)用于血常規(guī)的標(biāo)本均輕輕顛倒并仔細(xì)觀察,絕大部分可以檢查出。


2.抗凝劑與血液比例不正確:
   在凝血功能測(cè)定中,常有一些標(biāo)本量明顯不足,特別是兒童和入院檢查病人標(biāo)本,由于小孩采血難,入院時(shí)需檢查項(xiàng)目多,zui易發(fā)生抽血量不足,使PT、KPTT和TT假性延長(zhǎng),將誤導(dǎo)臨床診治。因此,血液未到刻度的標(biāo)本一律退回重抽。


3.標(biāo)本溶血:
   許多指標(biāo)在紅細(xì)胞內(nèi)和血清(血漿)明顯不同,溶血可使LDH、HBDH、血K+、AST 、ALT或等值異常升高。此類錯(cuò)誤是采血時(shí)的一些不良習(xí)慣造成,如:壓脈時(shí)間過(guò)長(zhǎng),采血不順利、抽血速度太快、血液注入容器時(shí)未取下針頭或用力過(guò)猛、等均可造成溶血。我們作過(guò)實(shí)驗(yàn),選擇20位體格檢查者,用兩種方法進(jìn)行比較:⑴用注射器抽血后不去除針頭直接將針頭插入真空采血管,這時(shí)在真空管負(fù)壓作用下針管內(nèi)的血液被吸入;⑵用注射器抽血后先除去針頭,然后打開(kāi)真空采血管蓋子緩緩注入標(biāo)本,兩種采血方法的標(biāo)本同時(shí)作部分生化項(xiàng)目檢測(cè),結(jié)果是:前者比后者LDH上升23.4%-58.2%,平均33.7%;HBDH上升22.5%-61.4%,平均35.4%;AST上升6.7%-31.6%,平均13.7%;ALT上升4.7%-18.2%,平均11.4%;血K+上升23.7%-71.2%,平均36.1%,其它如TP、GGT和UREA等也有或多或少的變化。因此,我們主張用真空采血系統(tǒng)自然流出的標(biāo)本為宜,如果必須用注射器抽血,抽血后要取下針頭,再緩緩將血液注入標(biāo)本采集管。對(duì)于未用真空采血系統(tǒng)的單位,若注射器和針頭連接不緊,采血時(shí)有空氣進(jìn)入或產(chǎn)生泡沫,使用劣質(zhì)采血器,標(biāo)本收集管沒(méi)有干燥均易造成溶血。


4.采血部位不當(dāng):
   有些病人需多次檢查,或輸液時(shí)間較長(zhǎng),有的護(hù)士會(huì)在病人輸液更換瓶子時(shí)放出一些血液送檢,即使先去除前面的10ml血液,結(jié)果也有明顯變化。如一例輸脂肪乳后直接從輸液的靜脈中采血,導(dǎo)致了許多結(jié)果錯(cuò)誤,影響前三位的是:TG為12.4mmol/L(平時(shí)為1.0 mmol/L左右),血小板達(dá)560×109/L(上升了4倍多),總蛋白濃度從60左右上升到91.6(g/L)。其它常有明顯影響的有血糖、血電解質(zhì)等項(xiàng)目。雖臨床也知道正確的采血方法,但由于護(hù)理人員流動(dòng)性大,工作量超負(fù)荷,不時(shí)有此類標(biāo)本送檢,只有反復(fù)與臨床溝通、宣傳,加上對(duì)標(biāo)本審核,對(duì)于血細(xì)胞比例明顯不對(duì),結(jié)果不合理或有異常變化,及時(shí)與臨床,減少不合格報(bào)告發(fā)出。


5.采血量不足:
   對(duì)于血培養(yǎng)而言,采血過(guò)少可降低培養(yǎng)的陽(yáng)性率。有文獻(xiàn)報(bào)告,當(dāng)培養(yǎng)的血量從2ml增加至20ml時(shí),血培養(yǎng)的陽(yáng)性率增加30%—50%,培養(yǎng)血量每增加1ml,陽(yáng)性率增加3%—5%。由于標(biāo)本已經(jīng)注入培養(yǎng)瓶,不能檢查是否符合要求,只有加強(qiáng)溝通交流,共同努力提高檢驗(yàn)質(zhì)量。


6.標(biāo)本采集時(shí)間不當(dāng):
   對(duì)細(xì)菌培養(yǎng)、激素檢查、找瘧原蟲(chóng)或絲蟲(chóng)病原體,需在特定的時(shí)間,以提高陽(yáng)性率。


7.標(biāo)本運(yùn)送和處理不及時(shí):
    標(biāo)本的運(yùn)送雖不屬采集范疇,但標(biāo)本采集再規(guī)范,若不能及時(shí)送檢,將嚴(yán)重影響檢驗(yàn)質(zhì)量。尿常規(guī)標(biāo)本需在二小時(shí)內(nèi)檢測(cè)完成,否則細(xì)胞等有形成分開(kāi)始破壞;離體過(guò)長(zhǎng)的標(biāo)本作血細(xì)胞分析時(shí)會(huì)影響分類結(jié)果;生化檢測(cè)的標(biāo)本也因?yàn)榧?xì)胞內(nèi)外物質(zhì)交換而變化。我們要求標(biāo)本及時(shí)送檢,到檢驗(yàn)中心的標(biāo)本盡快測(cè)定,不能及時(shí)測(cè)定的生化、免疫等標(biāo)本及時(shí)分離血清,加蓋并置4℃冷藏。

 

  上海勁馬熟練掌握先進(jìn)技術(shù)和信息,在ELISA試劑盒檢測(cè)中發(fā)揮的,其可靠性、靈敏度、重復(fù)性、特異性保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的曲線,贏得客戶的多次購(gòu)買(mǎi)。如果您對(duì)我司的產(chǎn)品感興趣,咨詢訂購(gòu)!

                 

 

 

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