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據(jù)上海勁馬業(yè)務(wù)員反映:經(jīng)常有客戶來(lái)咨詢,為什么我的WB實(shí)驗(yàn)中沒(méi)有得到目的蛋白條帶?通過(guò)長(zhǎng)期和客戶探討實(shí)驗(yàn)問(wèn)題,我們發(fā)現(xiàn)出現(xiàn)白板的原因真的很多:蛋白提取的不好;樣品保存不當(dāng);處理?xiàng)l件不對(duì);甚至有些WB操作問(wèn)題等等……只要客戶耐心去尋找根源,一步步發(fā)現(xiàn)并解決它,我們終會(huì)發(fā)現(xiàn),很多結(jié)果證明并非抗體本身的問(wèn)題。今天上海勁馬小編特意整理一份關(guān)于這方面的解說(shuō),希望能幫助到您!
*聲明:此處僅代表CST抗體,并非市面所有。
一些小的改變可能會(huì)導(dǎo)致結(jié)果的巨大變化。做WB和IP的時(shí)候,一些抗體對(duì)實(shí)驗(yàn)條件尤其敏感。我們建議客戶首先要確定以下幾個(gè)基本問(wèn)題:
1.目的細(xì)胞是否表達(dá)這種蛋白?豐度如何?
2.提取蛋白的細(xì)胞裂解液是否加入了蛋白酶抑制劑?對(duì)于磷酸化蛋白是否還加入了磷酸酶抑制劑?防止蛋白降解。
3.是否按照CST建議的操作方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)?
4.刺激處理是否恰當(dāng)?