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科研朋友們,您還在為做ELISA試劑盒實驗在各大貼吧尋求幫助嗎?還在為等“傳說中的大神”回復讓時間白白流逝嗎?還在為遇到一個問題不知道找誰交流嗎?選擇我們,告別迷茫。今天上海勁馬將帶您了解ELISA步驟核心包括哪些?就拿洗滌來說。這步驟有著決定性的作用,分有浸泡式、流水沖洗式兩種,ELISA中用的蒸餾水或去離子水,包括用于洗滌的,應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的本公司要求使用的純化水電導率小于1.5μs/cm。
一、保溫:
在建立ELISA方法作反應(yīng)動力學研究時,實驗表明,兩次抗原抗體反應(yīng)一般在37℃經(jīng)1-2小時,產(chǎn)物的可達。為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔,反應(yīng)板不宜疊放,以保證各板的溫度都能迅速平衡。應(yīng)注意溫育的溫度和時間應(yīng)按規(guī)定力求準確。由于公司的試劑盒溫育是在空氣浴中完成,采用水浴會造成值偏高或花板。另外溫育中還有邊緣效應(yīng),邊上的值會偏高,建議為了客觀的判斷結(jié)果,將質(zhì)控放在非邊緣位置。
二、基因工程抗原與合成肽抗原的區(qū)別:
基因工程抗原是抗原基因在質(zhì)粒載體中原核或真核表達的蛋白質(zhì)抗原,多以大腸桿菌或酵母菌為表達系統(tǒng)。該類抗原與合成肽相比,分子量大。合成肽采用化學方法制備,由于工藝的局限,合成數(shù)量有限,只能達到數(shù)百個氨基酸;而利用基因工程制備的抗原,分子量更大。
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