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勁馬文獻:轉(zhuǎn)染膠質(zhì)細胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子誘導(dǎo)神經(jīng)干細胞分化
何 佳1,鄢 波2(1三六三醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科,四川省成都市 610041;2四川大學(xué)華西醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科,四川省成都市 610041)
文章亮點:神經(jīng)元在生長、發(fā)育和受損時的存活依賴于多種營養(yǎng)因子的作用,其中膠質(zhì)細胞源性營養(yǎng)因子在促進神經(jīng)元的生長、分化和修復(fù)方面被認為是zui有潛力的營養(yǎng)因子。實驗采用脂質(zhì)體法將 PcDNA3-GDNF-GFP 表達質(zhì)粒成功轉(zhuǎn)染到神經(jīng)干細胞中,經(jīng)誘導(dǎo)后神經(jīng)干細胞能夠向神經(jīng)元以及多巴胺神經(jīng)元方向分化,從而為細胞移植治療神經(jīng)退行性疾病提供實驗依據(jù)。
關(guān)鍵詞:干細胞;分化;神經(jīng)干細胞;基因轉(zhuǎn)染;人膠質(zhì)細胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子;神經(jīng)元;多巴胺能神經(jīng)元;誘導(dǎo)分化;國家自然科學(xué)基金
主題詞:神經(jīng)干細胞;基因;膠質(zhì)細胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子;細胞分化;組織工程
基金資助:國家自然科學(xué)基金(81201010),項目名稱:HHV-6B 病毒感染誘導(dǎo)炎性網(wǎng)絡(luò)在顳葉內(nèi)側(cè)癲癇中的作用機制
縮略語:膠質(zhì)細胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子:glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF
摘要
背景:神經(jīng)干細胞為神經(jīng)系統(tǒng)功能重建和神經(jīng)再生提供了一條新的途徑,解決其定向誘導(dǎo)分化問題仍是目前的研究熱點。
目的:探討轉(zhuǎn)染膠質(zhì)細胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子基因誘導(dǎo)大鼠胚胎神經(jīng)干細胞向神經(jīng)元和多巴胺能神經(jīng)元分化的作用。
方法:構(gòu)建 PcDNA3-GDNF-GFP 表達質(zhì)粒,用脂質(zhì)體介導(dǎo)該質(zhì)粒轉(zhuǎn)染大鼠胚胎神經(jīng)干細胞并進行誘導(dǎo)分化,熒光顯微鏡觀察轉(zhuǎn)染情況,免疫熒光染色檢測 β 微管蛋白Ⅲ和酪氨酸羥化酶表達。
結(jié)果與結(jié)論:膠質(zhì)細胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子基因轉(zhuǎn)染后 3 d,可觀察到細胞呈綠色熒光細胞球狀。誘導(dǎo)分化 7 d,神經(jīng)干細胞分化為神經(jīng)元以及多巴胺神經(jīng)元的比例明顯增高。結(jié)果表明膠質(zhì)細胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子基因可以促進神經(jīng)干細胞向神經(jīng)元以及多巴胺能神經(jīng)元分化。
何佳,鄢波. 轉(zhuǎn)染膠質(zhì)細胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子誘導(dǎo)神經(jīng)干細胞分化[J].中國組織工程研究,2015,19(50): 8167-8171.
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