聯(lián)系電話
上海勁馬實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司
中級會員·17年
- 聯(lián)系人：
- 馮經(jīng)理
- 電話：
- 021-60521817
- 手機(jī)：
- 13817140470
- 售后：
- 86-021-61107441
- 傳真：
- 86－021－64881400
- 地址：
- 上海市松江區(qū)漕河涇研展路455號B座
- 個(gè)性化：
- www.shjmsw.com
- 手機(jī)站：
- m.shjmsw.com
- 網(wǎng)址：
- www.shjmsw.com
掃一掃訪問手機(jī)商鋪
ELISA實(shí)驗(yàn)常見的幾大結(jié)果問題有標(biāo)準(zhǔn)曲線較差、無信號、變異系數(shù)（CV）較大等，那么實(shí)質(zhì)導(dǎo)致的原因呢有多方面，具體的情況如下：
?標(biāo)準(zhǔn)曲線較差
原因一：標(biāo)準(zhǔn)品溶液配置有誤
解決方案：確認(rèn)是否進(jìn)行正確稀釋。
原因二：標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶不當(dāng)
解決方案：開蓋前進(jìn)行離心；檢查復(fù)溶后是否存在不溶物。
原因三：標(biāo)準(zhǔn)品已降解
解決方案：按推薦方式保存和處理標(biāo)準(zhǔn)品。
原因四：曲線的標(biāo)度不適合
解決方案：嘗試使用不同標(biāo)度繪制曲線，例如雙對數(shù)、5 參數(shù)擬合。
原因五：移液器加樣誤差
解決方案：正確使用經(jīng)過校準(zhǔn)的移液器
無信號
原因一：孵育時(shí)間過短
解決方案：樣品在 4 ℃ 孵育過夜，或遵循試劑的實(shí)驗(yàn)方案。
原因二：靶標(biāo)含量低于檢測范圍
解決方案：減小樣品的稀釋倍數(shù)或濃縮樣品。
原因三：樣品類型不適用
解決方案：對于沒有驗(yàn)證過的樣品類型，檢測信號可能減弱或沒有使用驗(yàn)證過的樣品類型作為陽性對照同時(shí)進(jìn)行檢測。
原因四：抗原表位被孔板吸附，無法識別
解決方案：使用直接或間接 ELISA 方法增強(qiáng)檢測肽的能力，將肽偶聯(lián)到大的載體蛋白上，然后包被到微量滴定板。
原因五：檢測緩沖液的相容性
解決方案：確保檢測緩沖液與靶標(biāo)兼容（例如，保留酶活性、保留蛋白質(zhì)相互作用）。
原因六：檢測試劑不足
解決方案：遵循試劑的實(shí)驗(yàn)方案，增加檢測試劑的濃度或用量。
原因七：樣品制備不正確
解決方案：確保進(jìn)行正確的樣品制備/稀釋。樣品可能與微量滴定板測定形式不兼容。
原因七：抗體不足
解決方案：嘗試不同的抗體濃度/稀釋。
原因八：孵育溫度過低
解決方案：確保在正確溫度下進(jìn)行孵育。所有試劑（包括孔板）在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)前應(yīng)處于室溫，或試劑的實(shí)驗(yàn)方案所建議的溫度。
原因九：波長不正確
解決方案：確認(rèn)波長，再次讀板。
原因十：孔板被強(qiáng)力洗滌
解決方案：檢查并確保自動洗滌系統(tǒng)的壓力正確。如果手動洗滌，則輕輕吸取沖洗緩沖液。
原因十一：孔變干
解決方案：測定開始后，不要讓孔變干。將所有的孵育步驟使用封口膜或膠帶密封孔板。
原因十二：酶反應(yīng)的顯色速度慢
使用前配制底物溶液。確保母液未過期、未污染。延長孵育時(shí)間。
變異系數(shù)（CV）較大
原因一：孔中有氣泡
解決方案讀板前，確保不存在氣泡。
原因二：孔洗滌不均/未充分洗滌
解決方案：檢查洗板機(jī)的所有管口是否暢通。使用推薦方法進(jìn)行洗滌。
原因三：試劑混勻不充分
解決方案：確保所有試劑充分混勻。
原因四：移液量不一致
解決方案：正確使用經(jīng)過校準(zhǔn)的移液器。
原因五：邊緣效應(yīng)
解決方案：確保孔板和所有試劑處于室溫。
原因六：樣品制備或保存條件不一致
解決方案：確保樣品制備保持一致，使用*的樣品保存條件（例如盡可能減少反復(fù)凍融）。
上海勁馬以誠信為本，努力打造的品牌，為您提供的售中、售前、售后服務(wù)，具有的技術(shù)團(tuán)隊(duì)，把上的產(chǎn)品引入國內(nèi)市場，滿足國內(nèi)廣大客戶的需求，在二十一世紀(jì)生命科學(xué)蓬勃發(fā)展的時(shí)代，將緊跟生命科學(xué)的發(fā)展動態(tài)，為廣大科研學(xué)者探索生命的奧秘而奉獻(xiàn)綿薄之力！
