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血球計(jì)數(shù)板被用以對(duì)人體內(nèi)紅、白血球進(jìn)行顯微計(jì)數(shù)之用，也常用于計(jì)算一些細(xì)菌、真菌、酵母等微生物的數(shù)量，是一種常見(jiàn)的生物學(xué)工具。
使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)時(shí)，先要測(cè)定每個(gè)小方格中微生物的數(shù)量，再換算成每毫升菌液(或每克樣品)中微生物細(xì)胞的數(shù)量。
1.視待測(cè)菌懸液濃度，加無(wú)菌水適當(dāng)稀釋(斜面一般稀釋100倍)，以每小格的菌數(shù)可數(shù)為度。
2.取潔凈的血球計(jì)數(shù)板一塊，在計(jì)數(shù)區(qū)上蓋上一塊蓋玻片。
3.將菌懸液搖勻，用滴管吸取少許，從計(jì)數(shù)板中間平臺(tái)兩側(cè)的溝槽內(nèi)沿蓋玻片的下邊緣滴入一小滴(不宜過(guò)多)，讓菌懸液利用液體的表面張力充滿計(jì)數(shù)區(qū)，勿使氣泡產(chǎn)生，并用吸水紙吸去溝槽中流出的多余菌懸液。
4.靜置片刻，使細(xì)胞沉降到計(jì)數(shù)板上，不再隨液體漂移。放置于顯微鏡的載物臺(tái)上夾穩(wěn)，找到計(jì)數(shù)區(qū)后，再轉(zhuǎn)換高倍鏡觀察并計(jì)數(shù)。
5.計(jì)數(shù)時(shí)若計(jì)數(shù)區(qū)是由16個(gè)中方格組成，按對(duì)角線方位，數(shù)左上、左下、右上、右下的4個(gè)中方格(即100小格)的菌數(shù)。如果是25個(gè)中方格組成的計(jì)數(shù)區(qū)，除數(shù)上述四個(gè)中方格外，還需數(shù)中央1個(gè)中方格的
菌數(shù)(即80個(gè)小格)。為了保證計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性，避免重復(fù)計(jì)數(shù)和漏記，在計(jì)數(shù)時(shí)，對(duì)沉降在格線上的細(xì)胞的統(tǒng)計(jì)應(yīng)有統(tǒng)一的規(guī)定。如菌體位于大方格的雙線上，計(jì)數(shù)時(shí)則數(shù)上線不數(shù)下線，數(shù)左線不數(shù)右線，以減少誤差。即位于本格上線和左線上的細(xì)胞計(jì)入本格，本格的下線和右線上的細(xì)胞按規(guī)定計(jì)入相應(yīng)的格中。
6.對(duì)于出芽的酵母菌，芽體達(dá)到母細(xì)胞大小一半時(shí)，即可作為兩個(gè)菌體計(jì)算。每個(gè)樣品重復(fù)計(jì)數(shù)2-3次(每次數(shù)值不應(yīng)相差過(guò)大，否則應(yīng)重新操作)，按公式計(jì)算出每mL(g)菌懸液所含細(xì)胞數(shù)量。
7.測(cè)數(shù)完畢，取下蓋玻片，用水將血球計(jì)數(shù)板沖洗干凈，切勿用硬物洗刷或抹擦，以免損壞網(wǎng)格刻度。洗凈后自行晾干或用吹風(fēng)機(jī)吹干，放入盒內(nèi)保存。
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