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有很多客戶向我們咨詢ELISA實驗后如何進行曲線制作?那么對于那么多的曲線計算公式,該如何選擇*的擬合方程呢?今天上海勁馬的技術(shù)員就給大家總結(jié)下:ELISA曲線擬合的那些事。
我們一般可以用軟件繪制也可以通過excel進行制作。按照科學(xué)分析方法,如果存在奇異點或者污點,直接采用線性分析不是很好,要對擬合曲線的幾個點進行取舍,同時也可以改用雙對數(shù)直線擬合或者四參數(shù)曲線擬合。
那么常用的曲線擬合回歸方程主要為以下幾種:
第yi種是直線回歸:直線回歸是簡單的回歸模型,也是zui基本的曲線擬合回歸分析方法,將所有的測試點擬合為一條直線,其擬合函數(shù)方程式為:y=a+bx。但是因為實際實驗中線性*的情況下可能直線回歸可以獲得較為理想的R2值。那么如果直線線性不理想的情況下如何擬合?
作為擁有十多年ELISA產(chǎn)品生產(chǎn)經(jīng)驗的企業(yè),我們會推薦用戶進行多項式擬合來改善直線回歸線性不理想的問題。
二次多項式擬合回歸方程:二次多項式成拋物線狀,開口向下或者向上,在很多ELISA實驗中,擬合近似于二次多項式的升段或者降段,所以使用二次多項式擬合時,保證取值的范圍都落在曲線的升段或者降段。其擬合函數(shù)方程式為:y=ax2+bx+c
對數(shù)擬合回歸方程:我們將標準品的O.D測值設(shè)為x軸,標準品濃度的對數(shù)作為y軸,濃度是自變量,O.D.值是因變量進行曲線擬合。
四參數(shù)擬合回歸方程:競爭法和夾心法都可以用到。它的形狀,根據(jù)情況,可能是一個單調(diào)上升的類似指數(shù),對數(shù),或雙曲線的曲線,也可能是一個單調(diào)下降的上述曲線,還可以是一條S形曲線。它要求X值不能小于0(因為指數(shù)是實數(shù),故有此要求)。在很多情況下它都可以擬合ELISA的反應(yīng)曲線,所以它也成了ELISA中應(yīng)用比較廣的模型之一。
曲線擬合方法雖多,要根據(jù)不同類型ELISA本身的特點,選擇比較適合的曲線擬合模型,才能得到合理的實驗結(jié)果。一般情況下,需要綜合考慮標準曲線的趨勢走向以及R值的大小以及樣本落值情況。