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人α 1-微球蛋白(α1-MG)酶聯(lián)免疫分析
試劑盒使用說明書
本試劑盒僅供研究使用。
檢測范圍: 96T
150ng/L -4800ng/L
使用目的:
本試劑盒用于測定人血清、血漿、尿液及相關液體樣本中α 1-微球蛋白 (α1-MG)含量。實驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人α 1-微球蛋白 (α1-MG)水平。用純化的人α 1微球蛋白 (α1-MG)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入α 1-微球蛋白(α1-MG),再與 HRP標記的α 1-微球蛋白 (α1-MG)抗體結合,形成抗體 -抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過*洗滌后加底物 TMB顯色。 TMB在 HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的α 1-微球蛋白 (α1-MG)呈正相關。用酶標儀在 450nm波長下測定吸光度( OD值),通過標準曲線計算樣品中人α 1-微球蛋白(α 1-MG)濃度。試劑盒組成
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標本要求
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于 -20℃保存,但應避免反復凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品,因 NaN3抑制辣根過氧化物酶的( HRP)活性。操作步驟
1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、
待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣 50µl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40µl,然后再加待測樣品 10µl(樣品zui終稀釋度為 5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 3 0分鐘。
4.配液:將 30倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30秒后棄去,如此重復 5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑 50µl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,再加入顯色劑 B50µl,輕輕震蕩混勻, 37℃避光顯色15分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50µl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11.測定:以空白空調(diào)零, 450nm波長依序測量各孔的吸光度( OD值)。測定應在加終止
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液后 15分鐘以內(nèi)進行。操作程序總結:
計算
以標準物的濃度為橫坐標, OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的 OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與 OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的 OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。注意事項
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡 15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3.各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在 5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本 OD值大于標準品孔*孔的 OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)( n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準 .
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。 10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。保存條件及有效期
1.試劑盒保存:;2-8℃。
2.有效期: 6個月
人補體片斷3b(C3b)ELISA Kit | Human Complement fragment 3b,C3b ELISA Kit |
人補體片斷4b(C4b)ELISA Kit | Human Complement fragment 4b,C4b ELISA Kit |
人補體片斷5b(C5b)ELISA Kit | Human Complement fragment 5b,C5b ELISA Kit |
人不對稱二甲基精氨酸(ADMA)ELISA Kit | Human asymmetrical dimethylarginine,ADMA ELISA Kit |
人腎小球組織糖基化終末產(chǎn)物(GTE-AGE)ELISA Kit | Human Glomerular tissue extract-advanced glycosylation end products,GTE-AGE ELISA Kit |
人組織多肽特異性抗原(TPS)ELISA Kit | Human tissue polypeptide specific antigen,TPS ELISA Kit |
人組織蛋白酶D(cath-D)ELISA Kit | Human cathepsin D,cath-D ELISA Kit |
人脂肪酶(Lipase)ELISA Kit | Human Lipase ELISA Kit |
人幽門螺旋桿菌IgM(Hp-IgM)ELISA Kit | Human Helicobacter pylori IgM,Hp-IgM ELISA Kit |
人烏頭酸酶2(ACO-2)ELISA Kit | Human aconitase 2,ACO-2 ELISA Kit |
人谷氨酸脫羧酶(GAD)ELISA Kit | Human glutamic acid decarboxylase,GAD ELISA Kit |
人細胞角蛋白20(CK-20)ELISA Kit | Human cytokeratin 20,CK-20 ELISA Kit |
人細胞角蛋白19(CK-19)ELISA Kit | Human cytokeratin 19,CK-19 ELISA Kit |
人細胞角蛋白18(CK-18)ELISA Kit | Human cytokeratin 18,CK-18 ELISA Kit |
人胃泌素(Gastrin)ELISA Kit | Human Gastrin ELISA Kit |
人α突觸核蛋白(α-SYN)ELISA Kit | Human α-Synuclein,α-SYN ELISA Kit |
人糖鏈抗原19-9(CA19-9)ELISA Kit | Human Carbohydrate antigen19-9,CA19-9 ELISA Kit |
人松弛肽/松弛素(RLN)ELISA Kit | Human Relaxin,RLN ELISA Kit |
人水蛭素(Hirudin)ELISA Kit | Human Hirudin ELISA Kit |
人他克莫司(FK506)ELISA Kit | Human Tacrolimus-FK506 ELISA Kit |
人神經(jīng)降壓素(NT)ELISA Kit | Human Neurotensin,NT ELISA Kit |
人上皮特異性抗原(ESA)ELISA Kit | Human epithelial specific antigen,ESA ELISA Kit |
人上皮膜抗原(EMA)ELISA Kit | Human Epithelial membrane antigen,EMA ELISA Kit |
人免疫球蛋白輕鏈lambda(λ-IgLC)ELISA Kit | Human lambda immunoglobulin light chain,λ-IgLC ELISA Kit |
人溶菌酶(LZM)ELISA Kit | Human Lysozyme,LZM ELISA Kit |
人凝聚素(CLU)ELISA Kit | Human clusterin,CLU ELISA Kit |
人T細胞受體(TCR)ELISA Kit | Human T cell receptor,TCR ELISA Kit |
人硫酸褪黑色素(MS)ELISA Kit | Human melatonin sulfate,MS ELISA Kit |
人可溶性磷脂酶A2(sPL-A2)ELISA Kit | Human soluble Phospholipase A2,sPL-A2 ELISA Kit |