人套膜蛋白（iNV）ELISA試劑盒使用說明書
Elisa kit規(guī)格：48孔配置/96孔配置
標準品稀釋液：1.5ml×1瓶
酶標試劑：3 ml×1瓶（48）/6 ml×1瓶（96）
【人套膜蛋白（iNV）ELISA試劑盒】本試劑僅供研究使用
計算：
以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。
試劑盒組成：
封板膜:2片（48）/2片（96）
說明書:1份
密封袋:1個
標準品： 2700ng/L 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃保存
酶標包被板: 1×48 1×96 2-8℃保存
樣品稀釋液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
顯色劑A液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
顯色劑B液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
終止液: 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存
濃縮洗滌液:（20ml×20倍）×1瓶 （20ml×30倍）×1瓶 2-8℃保存
實驗原理：
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人套膜蛋白（iNV）水平。用純化的人套膜蛋白（iNV）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入抗血小板抗體IgG/M/A（PA-IgG/M/A），再與HRP標記的抗血小板抗體IgG/M/A（PA-IgG/M/A）抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的抗血小板抗體IgG/M/A（PA-IgG/M/A）呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中人套膜蛋白（iNV）濃度。
目的：本試劑盒用于測人血清，血漿及相關液體樣本中抗血小板抗體IgG/M/A（PA-IgG/M/A）的含量。
服務承諾：
供貨期：款到發(fā)貨。
工作時間內免費的技術咨詢和指導 。請
為客戶提供來樣檢測服務，zui大限度實驗結果的有效性（免費代測）。
保存條件及有效期：
試劑盒保存：2-8℃| 有效期：6個月
操作步驟
1. 標準品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設標準品孔10孔，在*、第二孔中分別加標準品100μl，然后在*、第二孔中加標準品稀釋液50μl，混勻；然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為1800ng/L，1200ng/L ，600ng/L，300ng/L， 150ng/L）。
2. 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
11. 測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
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