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ELISA檢測一抗的效價

時間:2014-12-29閱讀:293
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ELISA檢測一抗的效價實驗數(shù)據(jù)是1-6號為陽性,每次稀釋成之前的1|2

記錄結(jié)果有下列幾種方法:
1“+"“-":所有超過規(guī)定的O.D值(如O.D,0.4)的標(biāo)本均屬陽性,此規(guī)定O.D值是根據(jù)事先測定大量陰性標(biāo)本所取得的,此規(guī)定值是陰性標(biāo)本的上限?;蛘咭砸唤M陰性標(biāo)本O.D平均值加23個標(biāo)準(zhǔn)差作為陽性閾值。
2、直接以O.D值來表示,如0.4、0.71.2,O.D值越大,陽性反應(yīng)越強,但此數(shù)值是在固定實驗條件下得到的結(jié)果,而且每次實驗都要有參考標(biāo)本作對照。
3、以終點滴度表示:將標(biāo)本作連續(xù)稀釋,zui高稀釋度能出現(xiàn)陽性反應(yīng)者(即OD值仍大于陽性閾值,即為該標(biāo)本的滴度。
4、以比值"表示:求出被檢標(biāo)本的O.D值與一組陰性標(biāo)本O.D值的比值,例如為陰性標(biāo)本的2倍或3倍,即為陽性,比值小于2.1而大于1.5為可疑,<1.5為陰性。
測定標(biāo)本O.D-空白O.D         陰性對照O.D-空白O.D
如在此測定時以空白校正“O"點。
5、以單位"來表示:在測定被檢標(biāo)本的同時,再測定一個含已知單位數(shù)的陽性參考血清,用不同稀釋度作ELISA檢測后,以O.D值為縱坐標(biāo),單位數(shù)為橫坐標(biāo),畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。以后可根據(jù)被檢標(biāo)本的O.D值,從曲線上找出相應(yīng)的單位數(shù),再乘于血清的稀釋倍數(shù),即可得出被檢標(biāo)本的單位數(shù)。
作試驗時的陰性參考血清不要顯色,否則會對結(jié)果判斷帶來困難,特別在目測時,當(dāng)陽性標(biāo)本O.D>2.0時,應(yīng)作適當(dāng)稀釋后再作測定。

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