小鼠骨涎蛋白(BSP)ELISA檢測(cè)試劑盒ELISA試劑盒檢測(cè)方法:雙抗體夾心法、雙抗原夾心法、間接法測(cè)抗體、雙位點(diǎn)一步法、 競(jìng)爭(zhēng)法 、捕獲法、ABS-ELISA方法,我們子科生物主要采用雙抗體夾心法。詳細(xì)可以咨詢我們銷售人員。
標(biāo)本的采集及保存:
1. 血清:全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4℃過了夜后于1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3.細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
注:標(biāo)本溶血會(huì)影響zui后檢測(cè)結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測(cè)。
小鼠骨涎蛋白(BSP)ELISA檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)操作注意事項(xiàng):
☆試劑準(zhǔn)備:所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫,使用后請(qǐng)立即按照說(shuō)明書要求保存。實(shí)驗(yàn)操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉污染。
☆加樣:加樣時(shí),要控制加樣速度,避免*孔與zui后一孔之見的時(shí)間間隔過大,否則將會(huì)導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時(shí)間,從而影響實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性;一般加樣時(shí)間控制在10分鐘內(nèi),如果樣本數(shù)量過多,可使用多道移液器。
☆孵育:樣品要在密閉的容器內(nèi)進(jìn)行孵育,嚴(yán)格按照說(shuō)明書上規(guī)定的孵育時(shí)間和溫度進(jìn)行。
☆洗滌:洗滌過程中反應(yīng)孔中的殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上充分拍干,同時(shí)要消除板底殘留的液體和手指痕跡,避免影響zui后的酶標(biāo)儀讀數(shù)。
☆反應(yīng)時(shí)間的控制:加入底物后請(qǐng)定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化(比如,10分鐘左右),如果顏色較深,請(qǐng)?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
☆建議實(shí)驗(yàn)前預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過高,應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,計(jì)算結(jié)果時(shí)乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
☆建議使用本試劑盒時(shí)先做預(yù)實(shí)驗(yàn)(即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線,試用幾個(gè)標(biāo)本),如果對(duì)本試劑盒有任何疑問,可和所購(gòu)經(jīng)銷商,如果因運(yùn)輸過程導(dǎo)致試劑盒失效,可要求調(diào)換,但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失。
操作步驟:
1、 取出試劑盒,于室溫(20-25℃)放置15-30分鐘。實(shí)驗(yàn)過程應(yīng)在室溫(20-25℃)內(nèi)進(jìn)行。
2、 取出酶標(biāo)板,按照標(biāo)準(zhǔn)品的次序分別加入50μl的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中。
3、空白微孔中加入50μl的樣品,空白對(duì)照加入50μl的蒸餾水;
4、 在樣品孔中加入10μl的生物素;(不含空白對(duì)照孔,切忌:生物素只加樣品孔!)
5、在各孔中加入100μl的酶標(biāo)記溶液;(不含空白對(duì)照孔)
6、將酶標(biāo)板用封口膠密封后,37℃孵育反應(yīng) 1小時(shí);(在孵育箱中保持穩(wěn)定的溫度與濕度)
7、 充分清洗酶標(biāo)板3-5次,保持各孔有充足的水壓;(濃縮洗滌液以1:100的比例與蒸餾水稀釋)
8、酶標(biāo)板洗滌后用吸水紙*拍干;
9、各孔加入顯色劑A、B液各50μl;(不含空白對(duì)照孔)
10、各孔加入50μl終止液,終止反應(yīng);10、20-25℃下避光反應(yīng)15分鐘;
小鼠骨涎蛋白(BSP)ELISA檢測(cè)試劑盒結(jié)果判斷:
1、30分鐘內(nèi)在波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值;
2、以O(shè)D值為縱坐標(biāo),以標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為橫坐標(biāo),繪制曲線圖;
3、根據(jù)樣品的OD值查找對(duì)應(yīng)的濃度范圍;
磺胺甲嘧啶 Sulfadiazine ELISA Test Kit 96T
磺胺甲噁唑 Sulfamethoxazole ELISA Test Kit 96T
鏈霉素 Streptomycin ELISA Test Kit 96T
蘇丹紅 Sudan red ELISA Test Kit 96T
四環(huán)素 Tetracycline (TET) ELISA Test Kit 96T
睪酮 Testosterone ELISA Test Kit 96T
群勃龍 trenbolone ELISA Test Kit 96T
泰樂菌素 Tylosin ELISA Test Kit 96T
鯉魚卵黃蛋白原 Cyprinoid vilogenin Test Kit 96T
虹鱒魚卵黃蛋白原 Rainbow trout vilogenin Test Kit 96T
鮭科魚卵黃蛋白原 Surname vilogenin Test Kit 96T
斑馬魚卵黃蛋白原 Zebra fish vilogenin Test Kit 96T
青鳉魚卵黃蛋白原 Medaka vilogenin Test Kit 96T
黑魚卵黃蛋白原 snakehead vilogenin Test Kit 96T