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上海奧陸生物科技有限公司

A549人肺癌細(xì)胞 背景資料

時(shí)間:2017-4-14閱讀:509
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細(xì)胞名稱    人肺癌細(xì)胞;A549 [A-549]
形態(tài)特性    上皮樣;多角形
生長(zhǎng)特性    貼壁生長(zhǎng)
特征特性    該細(xì)胞系是1972年由Giard DJ通過肺癌組織移植培養(yǎng)建系的,源自一位58歲的白人男性。A549能通過胞苷二磷脂酰*途徑合成富含不飽和脂肪酸的*;角蛋白陽性。 
培養(yǎng)條件    McCoy's Media (Modified with Tricine)  10%FBS
傳代方法    1:3~1:8傳代;每周2~3次。
傳代情況    C5
凍存條件    基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè)   培養(yǎng)法(-)
STR    Amelogenin:X,Y;CSF1PO:10,12;D13S317:11;D16S539:11,12;D18S51:14,17;D19S433:13;D21S11:29;D2S1338:24;D3S1358:16;D5S818:11;D7S820:8,11;D8S1179:13,14;FGA:23;TH01:8,9.3;TPOX:8,11;vWA:14;
同工酶   
染色體    60~66,XY
使用權(quán)限   A類

規(guī)格:70%密度的25cm2培養(yǎng)瓶的細(xì)胞一瓶
特點(diǎn):細(xì)胞代數(shù)為4代以內(nèi)
包裝:內(nèi)層無菌自封袋;防壓泡沫盒;外層防壓保溫氣泡袋;說明書
細(xì)胞來源:ATCC、sciencell、ICLC
貨期:1-2周
運(yùn)輸方式:快遞運(yùn)輸
售后:收到細(xì)胞后7天,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問題(如污染,死亡,快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí),應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報(bào)告并及時(shí)傳真或致銷售人員,我們將盡快為您解決!

奧陸生物與您攜手共進(jìn)!人肺癌細(xì)胞;A549 [A-549]

以下細(xì)胞處理方法及細(xì)胞說明書僅供參考,具體操作還需要根據(jù)到貨時(shí)細(xì)胞密度,細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)等具體情況,酌情處理,如需要更詳細(xì)技術(shù)指導(dǎo),請(qǐng)及時(shí)或郵件。
需要特別指出的是:如細(xì)胞出現(xiàn)問題,請(qǐng)于48h內(nèi)及時(shí)反饋,本公司將竭誠(chéng)為您服務(wù)!
一.貼壁細(xì)胞  
客戶接收到細(xì)胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X ,200X 各一張)。
顯微鏡觀察細(xì)胞,當(dāng)細(xì)胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細(xì)胞應(yīng)該在37度培養(yǎng)箱預(yù)溫1-2h后再做處理。如未達(dá)到細(xì)胞傳代密度,培養(yǎng)瓶應(yīng)預(yù)留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,加入適量的0.05%*-EDTA消化細(xì)胞,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。 
1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2  培養(yǎng)。
二.懸浮細(xì)胞 
1. 接收到細(xì)胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X ,200X 各一張)。
3. 嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒)。
5. 1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。 換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基,37℃,5%CO2  培養(yǎng)。
三.一毫升小管操作方法  小管內(nèi)也是此細(xì)胞。 
1. 用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)。
2. 嚴(yán)格無菌操作,用吸管吸出管中細(xì)胞至9ml*培養(yǎng)基混勻。
3. 1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。 
4.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2  培養(yǎng)。人肺癌細(xì)胞;A549 [A-549]

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