JC-1 Mitochondrial Membrane Potential Assay Kit

JC-1線粒體膜電位檢測試劑盒

溫馨提示：見我司整理線粒體熒光探針產(chǎn)品專題。

產(chǎn)品標(biāo)簽

Rhodamine 123 羅丹明123；JC-1；JC-10；CCCP；CAS：62669-70-9

產(chǎn)品信息

產(chǎn)品描述

JC-1線粒體膜電位檢測試劑盒（JC-1 Mitochondrial Membrane Potential Assay Kit）是一種以JC-1為熒光探針，快速且靈敏的檢測細(xì)胞、組織或純化線粒體膜電位變化的試劑盒。因線粒體膜電位的下降是細(xì)胞凋亡早期的一個標(biāo)志性事件。因此本試劑盒可用于早期的細(xì)胞凋亡檢測。

JC-1 是一種廣泛用于檢測線粒體膜電位△Ψm位的理想熒光探針。JC-1染料以電勢依賴性的方式積聚在線粒體內(nèi)，可以用來檢測細(xì)胞、組織或純化的線粒體膜電位。正常線粒體內(nèi)，JC-1聚集在線粒體基質(zhì)中形成聚合物，聚合物發(fā)出強烈的紅色熒光（Ex=585 nm, Em=590 nm）；不健康的線粒體由于膜電位的下降或喪失，JC-1只能以單體的形式存在于胞漿中，產(chǎn)生綠色熒光（Ex=514 nm, Em=529 nm）。JC-1不僅可用于定性檢測，因顏色的變化可以非常直接的反映出線粒體膜電位的變化。也可以用于定量檢測，因線粒體的去極化程度可以通過紅/綠熒光強度的比例來衡量。

本試劑盒提供CCCP用作線粒體膜電位喪失的陽性對照。對于六孔板樣品，本試劑盒可檢測100個樣品。

產(chǎn)品包裝

保存與運輸方法

保存：-20℃保存，1年有效。

運輸：冰袋運輸。

注意事項

1. JC-1（200×）在4℃、冰浴等較低溫度情況下會凝固而粘在離心管管底、管壁或管蓋內(nèi)，可以20～25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。
2. 裝載完JC-1后用JC-1染色緩沖液（1×）洗滌時，使JC-1染色緩沖液（1×）保持4℃左右，此時洗滌效果較好。
3. JC-1探針裝載完并洗滌后盡量在30min內(nèi)完成后續(xù)檢測。在檢測前需冰浴保存。
4. 請勿把JC-1染色緩沖液（5×）全部配制成JC-1染色緩沖液（1×），本試劑盒使用過程中需直接使用JC-1染色緩沖液（5×）。
5. 如果發(fā)現(xiàn)JC-1染色緩沖液（5×）中有沉淀，必須全部溶解后才能使用，可在37℃加熱促進(jìn)溶解。
6. CCCP為線粒體電子傳遞鏈抑制劑，有毒，請注意小心防護(hù)。
7. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

使用方法【詳見懋康】

1. JC-1染色工作液制備
2. JC-1 染色工作液的量為1ml，其他培養(yǎng)器皿的JC-1 染色工作液的用量以此類推；對于細(xì)胞懸液每50～100萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。
3. JC-1（200×），按照每50μL JC-1（200×）加入8mL 超純水的比例稀釋JC-1。劇烈震蕩充分溶解并混勻JC-1。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液（5×），混勻后即為JC-1染色工作液。
4. JC-1（200×）用超純水（試劑盒提供）充分溶解混勻后，才可加入JC-1染色緩沖液（5×）。不可先配制JC-1染色緩沖液（1×）再加入JC-1（200×），這樣JC-1會很難充分溶解，會嚴(yán)重影響后續(xù)的檢測。
5. 陽性對照的設(shè)置
6. （10mM）推薦按1∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中，稀釋至10μM，處理細(xì)胞20min。隨后按照下述方法裝載JC-1，進(jìn)行線粒體膜電位的檢測。
7. 10μM CCCP處理20 min后線粒體的膜電位會*喪失，JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光；而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細(xì)胞，CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同，需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
8. 對于懸浮細(xì)胞
9. 對于貼壁細(xì)胞
10. 對于純化的線粒體

1. 熒光觀測和結(jié)果分析

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 — —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】

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MX3204 JC-1線粒體膜電位檢測試劑盒

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