CellROX Green Reagent, for oxidative stress detection

氧化應(yīng)激檢測用探針（綠色）

溫馨提示：

見我司（懋康生物）整理的活性氧ROS熒光探針專題。

見我司（懋康生物）整理的CellROX Reagent, for oxidative stress detection 氧化應(yīng)激檢測探針產(chǎn)品專題。

搜索關(guān)鍵詞：

Reactive oxygen species (ROS) 活性氧；DCFH-DA；HPF 羥苯基熒光素；Mitosox 線粒體超氧化物探針；Dihydroethidium (DHE)  二氫乙錠；ROSGreen^TM H₂O₂ Probe；Life (Molecular Probe) ；

訂購信息：

產(chǎn)品描述：

CellROX Green Reagent是一種檢測活細(xì)胞氧化應(yīng)激的新型熒光探針。此細(xì)胞膜滲透性的染料在還原態(tài)時(shí)無熒光或呈微弱熒光，一旦被活性氧物質(zhì)（ROS）氧化并結(jié)合到DNA后發(fā)明亮穩(wěn)定的綠色熒光，大吸收/發(fā)射波長約~485/520 nm（見圖I. CellROX Green氧化后的熒光光譜圖）。其熒光信號(hào)主要定位在細(xì)胞核和線粒體。此染料能夠被甲醛固定且能承受表面活性劑處理，因此，特別適合與其他兼容性染料和抗體進(jìn)行多重標(biāo)記檢測。CellROX Green Reagent與各種檢測平臺(tái)兼容，比如傳統(tǒng)熒光顯微鏡、高內(nèi)涵篩選儀器（HCS）、流式細(xì)胞儀、熒光酶標(biāo)儀或高通量篩選（HTS）。還與各種臺(tái)式儀器兼容，比如FLoid™，Tali™，和Attune™儀器。

圖1. CellROX Green氧化后的熒光光譜圖

本品以穩(wěn)定、即用型的DMSO溶液形式提供，濃度為2.5mM，操作簡單，勿需清洗，與熒光顯微鏡的標(biāo)準(zhǔn)工作流程兼容。每管染料（50µl）足夠做1個(gè)96孔板或20張爬片。適用于任何細(xì)胞類型的氧化應(yīng)激檢測。

注意事項(xiàng)

1. 本品對光和空氣敏感，使用過程中切記不可長時(shí)間敞開瓶蓋。當(dāng)瓶子開口后建議丟掉未用完的材料。
2. 為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

使用方法

1. 需要自行準(zhǔn)備的材料
   1. 細(xì)胞和培養(yǎng)基
   2. 生理鹽緩沖液（PBS，pH 7.2-7.6）
      1. 【可選】固定劑（比如，溶于PBS的3.7%甲醛）
      2. 【可選】破膜劑（比如，0.5% Triton X-100）
2. 實(shí)驗(yàn)步驟

以下步驟專門為BPAE，HepG2, U-2 OS和RAW巨噬細(xì)胞所開發(fā)，優(yōu)化后的染色工作濃度為5µM，但是此實(shí)驗(yàn)適用于任何細(xì)胞類型。生長培養(yǎng)基、細(xì)胞密度、細(xì)胞類型變化和其他因素可能會(huì)影響標(biāo)記效率。在初始實(shí)驗(yàn)，建議設(shè)置濃度梯度，以確定加的實(shí)驗(yàn)條件和適合研究細(xì)胞類型的工作濃度。

CellROX Green Reagent對光和空氣敏感，使用過程中切記不可長時(shí)間敞開瓶蓋。當(dāng)瓶子開口后建議丟掉未用完的材料。

應(yīng)用示例

圖II. CellROX Green Reagent測定牛肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞（BPAE）的氧化應(yīng)激水平。在MatTek激光共聚焦玻底培養(yǎng)皿內(nèi)鋪BPAE細(xì)胞。之后用含維生素K3（100µM）或不含維生素K3的培養(yǎng)基37℃處理1h。向某些對照和維生素K3處理孔內(nèi)加入N-乙酰半胱氨酸（NAC，50µM）。之后細(xì)胞用CellROX Green Reagent（5µM）和Hoechst 33342染色，前者加入*培養(yǎng)基內(nèi)37℃孵育30min。細(xì)胞經(jīng)PBS清洗后，在Zeiss Axiovert倒置顯微鏡下檢測（40X物鏡）。

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——Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】

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CellRox Green 氧化應(yīng)激檢測探針綠色

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