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上海懋康生物科技有限公司
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當(dāng)前位置:上海懋康生物科技有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)>>細(xì)胞增殖與凋亡>> MX3201細(xì)胞凋亡雙染試劑盒

細(xì)胞凋亡雙染試劑盒

參  考  價(jià):318
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 型號(hào)

    MX3201

  • 品牌

    其他品牌

  • 廠商性質(zhì)

    生產(chǎn)商

  • 所在地

    上海市

規(guī)格

100T 318元 1000 mg 可售

更新時(shí)間:2024-03-12 16:51:03瀏覽次數(shù):2072次

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細(xì)胞凋亡雙染試劑盒(Hoechst 33342/PI Double Stain Kit)是一種采用Hoechst 33342和碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)雙染進(jìn)行細(xì)胞凋亡與壞死分析的檢測(cè)試劑盒。檢測(cè)原理在于:Hoechst 33342是一種活細(xì)胞核染料,能穿透正常細(xì)胞以及凋亡細(xì)胞膜,與DNA結(jié)合(很大激發(fā)波長(zhǎng)為350nm,發(fā)射波長(zhǎng)為461nm

Hoechst 33342/PI Double Stain Kit細(xì)胞凋亡雙染試劑盒


產(chǎn)品標(biāo)簽

Hoechst 33342/PI凋亡檢測(cè)試劑盒,JC-1膜電位檢測(cè);Annexin V-FITC/PI凋亡檢測(cè)試劑盒TUNEL細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒;


產(chǎn)品信息

產(chǎn)品名稱(chēng)

產(chǎn)品編號(hào)

規(guī)格

價(jià)格(元)

Hoechst 33342/PI Double Stain Kit 細(xì)胞凋亡雙染試劑盒

MX3201-100T

100T

318


產(chǎn)品描述

Hoechst 33342/PI細(xì)胞凋亡雙染試劑盒(Hoechst 33342/PI Double Stain Kit)是一種采用Hoechst 33342和碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)雙染進(jìn)行細(xì)胞凋亡與壞死分析的檢測(cè)試劑盒。檢測(cè)原理在于:Hoechst 33342是一種活細(xì)胞核染料,能穿透正常細(xì)胞以及凋亡細(xì)胞膜,與DNA結(jié)合(大激發(fā)波長(zhǎng)為350nm,發(fā)射波長(zhǎng)為461nm),呈現(xiàn)藍(lán)色熒光。當(dāng)細(xì)胞發(fā)生凋亡,染色質(zhì)發(fā)生固縮,染色后的細(xì)胞熒光比正常細(xì)胞明顯增強(qiáng)。而PI是一種死細(xì)胞核染料,不能穿透細(xì)胞膜,對(duì)于具完整細(xì)胞膜的正常細(xì)胞或凋亡細(xì)胞不能染色。但對(duì)于壞死細(xì)胞,由于膜的完整性喪失,PI能夠穿透進(jìn)入細(xì)胞,與DNA結(jié)合(大激發(fā)波長(zhǎng)為536nm,發(fā)射波長(zhǎng)為617nm),呈現(xiàn)紅色熒光。經(jīng)Hoechst 33342/PI雙染后,使用流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡檢測(cè),正常細(xì)胞為弱紅色熒光+弱藍(lán)色熒光;凋亡細(xì)胞為弱紅色熒光+強(qiáng)藍(lán)色熒光;壞死細(xì)胞為強(qiáng)紅色熒光+弱藍(lán)色熒光。

本試劑盒可檢測(cè)100個(gè)樣品,每個(gè)樣本的細(xì)胞數(shù)量可為0.1~1×06


產(chǎn)品包裝

編號(hào)

組分名稱(chēng)

規(guī)格

保存方法

MX3201-A

Cell Stain Buffer 細(xì)胞染色緩沖液(2×

100ml

4℃或-20℃

MX3201-B

Hoechst 33342 Stain Hoechst染色液

0.5ml

-20避光

MX3201-C

PI Stain PI染色液

0.5ml

-20避光


注意事項(xiàng)

  • 熒光染料均存在淬滅的問(wèn)題,建議染色后盡快檢測(cè)

  • Hoechst 33342孵育細(xì)胞時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),一般控制在20min內(nèi)太長(zhǎng)容易引起探針的發(fā)射光譜由藍(lán)光向紅光遷移,導(dǎo)致紅色熒光與藍(lán)色熒光的比例改變。

  • PI對(duì)人體有一定的刺激性,請(qǐng)注意適當(dāng)防護(hù)。

  • 如果要進(jìn)行組織的凋亡和壞死檢測(cè),請(qǐng)將組織消化制備成單細(xì)胞懸液后再檢測(cè)。

  • 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。


注意事項(xiàng)

1)本品不是臨床藥物,只能用于科研用途,不能用于診斷或臨床用途。

2)為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。


使用方法

一、細(xì)胞樣本制備

1.1 貼壁細(xì)胞

1.1.1 小心收集細(xì)胞培養(yǎng)液到一個(gè)無(wú)菌離心管內(nèi)備用;

1.1.2 用yi蛋白酶消化細(xì)胞至細(xì)胞可以輕輕用移液槍或槍頭吹打下來(lái),加入前面收集的細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下所有貼壁細(xì)胞,并輕輕吹散細(xì)胞

1.1.3 收集上述細(xì)胞懸液到離心管內(nèi),4℃,1000g離心3~5min,使細(xì)胞沉至管底,小心吸取上清并丟棄,可留約50μl培養(yǎng)液,以免吸走細(xì)胞。【注意】:某些特殊細(xì)胞,如果沉淀不充分,可以適當(dāng)提高離心力或者延長(zhǎng)離心時(shí)間。

1.1.4 加入約1ml提前預(yù)冷的PBS,重懸細(xì)胞,并轉(zhuǎn)移到1.5ml無(wú)菌離心管,4℃,1000g離心3~5min,使細(xì)胞沉至管底。

1.1.5 小心吸取上清并丟棄,可留約50μl PBS,以免吸走細(xì)胞。輕輕彈擊離心管底以適當(dāng)分散細(xì)胞,避免細(xì)胞成團(tuán)。

1.2 懸浮細(xì)胞

1.2.1 4℃,1000g離心3~5min,使細(xì)胞沉至管底,小心吸取上清并丟棄,可留約50μl培養(yǎng)液,以免吸走細(xì)胞。

1.2.2 加入約1ml提前預(yù)冷的PBS,重懸細(xì)胞,并轉(zhuǎn)移到1.5ml無(wú)菌離心管,4℃,1000g離心3~5min,使細(xì)胞沉至管底。

1.2.3 小心吸取上清并丟棄,可留約50μl PBS,以免吸走細(xì)胞。輕輕彈擊離心管底以適當(dāng)分散細(xì)胞,避免細(xì)胞成團(tuán)。


染色前制備

2.1細(xì)胞染色緩沖液(1×)的準(zhǔn)備:取適量細(xì)胞染色緩沖液(2×)與無(wú)菌去離子水或蒸餾水等比例混合,即為細(xì)胞染色緩沖液(1×),4℃保存?zhèn)溆谩?/span>

2.2 細(xì)胞重懸:將上述收集好的0.1~1×06細(xì)胞,加入0.9ml 細(xì)胞染色緩沖液(1×,重懸細(xì)胞沉淀。

三、Hoechst 33342/PI雙染

3.1 加入5μl Hoechst 33342染色液,置于37℃水浴,孵育5~15min。

3.2 置于冰水冷卻,4℃,1000g離心3~5min,使細(xì)胞沉至管底,棄上層染色液。

3.3 加入0.9ml 細(xì)胞染色緩沖液(1×),重懸細(xì)胞沉淀。

3.4 加入5μl PI染色液,置于冰浴或4℃,孵育20~30min。

【注意】:也可一步法進(jìn)行染色:加入5μl Hoechst 33342染色液和5μl PI染色液,輕輕混勻,置于冰浴或4℃,孵育20~30min。


四、結(jié)果分析

4.1 流式細(xì)胞儀檢測(cè)

用流式細(xì)胞儀在激發(fā)波長(zhǎng)400~500nm處檢測(cè)藍(lán)色熒光,在>630nm處檢測(cè)紅色熒光,同時(shí)檢測(cè)光散射情況。采用適當(dāng)分析軟件進(jìn)行細(xì)胞DNA含量分析和光散射分析。

4.2 熒光顯微鏡檢測(cè)

檢測(cè)前,4℃,1000g離心3~5min沉淀細(xì)胞,用PBS洗滌一次,再涂片觀察紅色和藍(lán)色熒光。

【注意】:對(duì)于貼壁細(xì)胞,也可不收集細(xì)胞,棄培養(yǎng)液后直接依次按照上述比例加入細(xì)胞染色緩沖液(1×)、Hoechst 33342染色液、PI染色液,置于冰浴或4℃,孵育20~30min。染色后,PBS洗滌一次,再在熒光顯微鏡下觀察。

4.3 結(jié)果呈現(xiàn)

正常細(xì)胞呈低藍(lán)光/低紅光,凋亡細(xì)胞呈高藍(lán)光/低紅光;壞死細(xì)胞呈低藍(lán)光/高紅光。


相關(guān)產(chǎn)品

貨號(hào)

名稱(chēng)

規(guī)格

MX3210-20T

Annexin V-FITC/PI Apoptosis Detection Kit 細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒

20T

MX3212-20T

Annexin V-EGFP/PI Apoptosis Detection Kit 細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒

20T

MX3214-30T

Annexin V-APC/7-AAD Apoptosis Detection Kit  細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒

30T

MX3216-20T

TUNEL Apoptosis Detection Kit (FITC) 細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒(綠色熒光)

20T

MX3221-20T

Apoptotic DNA-Ladder Detection Kit 細(xì)胞凋亡DNA-Ladder檢測(cè)試劑盒

20T

MX3204-100T

JC-1 Mitochondrial Membrane Potential Assay Kit  JC-1線粒體膜電位檢測(cè)試劑盒

100T


— —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】



上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域研究的試劑、儀器和實(shí)驗(yàn)室消耗品與實(shí)驗(yàn)服務(wù)工作,主要從事細(xì)胞生物學(xué)、植物學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)、蛋白組學(xué)。生物制藥與診斷試劑研發(fā)生產(chǎn)等領(lǐng)域。 本公司秉承以人為本,以誠(chéng)為信、合同守信"的經(jīng)營(yíng)理念。堅(jiān)持"品質(zhì)保障"的原則為廣大客戶提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品。


細(xì)胞凋亡雙染試劑盒

細(xì)胞凋亡雙染試劑盒


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