細(xì)胞:L929細(xì)胞
中文名稱:小鼠成纖維細(xì)胞
生長特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴(yán)格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
(網(wǎng)絡(luò)信息主針對網(wǎng)絡(luò)推廣作用,僅供參考,細(xì)胞培養(yǎng)請咨詢細(xì)胞庫管理員,以細(xì)胞庫管理員提供給您的信息為準(zhǔn),操作前,如果有不明白之處,先咨詢細(xì)胞庫管理員,避免不必要的損失;)
利用趨化因子來協(xié)助移植干細(xì)胞整合到受傷的大腦上,從而幫助腦癱兒童恢復(fù)喪失的功能。
大腦麻痹患者有約50萬人,如生產(chǎn)時(shí)缺氧或者產(chǎn)前感染都可能導(dǎo)致出生前或者出生后出現(xiàn)的腦損傷,近年來由于嬰兒存活率增加這類病人的數(shù)目也增加,病情嚴(yán)重程度也從微弱到失去活動能力不等。
將供體小鼠的干細(xì)胞移植到腦癱小鼠模型的循環(huán)系統(tǒng)中。初步的結(jié)果顯示干細(xì)胞能整合到受傷位點(diǎn),但是能完成這個(gè)旅程的細(xì)胞非常少。
我們知道我們能使干細(xì)胞進(jìn)入到大腦并變成大腦細(xì)胞,但是我們并不真正知道它們工作的到底如何。這些細(xì)胞或許真的形成了神經(jīng)細(xì)胞間通訊所必需的軸突,但問題是所有這些是否促進(jìn)了功能的改善嗎?
為了回答這個(gè)問題,開始研究用直接大腦注射法是否能增加整合細(xì)胞的數(shù)量,以及添加chemokines是否能協(xié)助這些細(xì)胞恢復(fù)大腦功能。
正在研究將移植干細(xì)胞細(xì)胞與一些天然的趨化因子(chemokines)一起直接注射到大腦中時(shí),移植干細(xì)胞效果是否更好。趨化因子是重要的生長因子,能夠吸引白血球快速聚集到受傷位點(diǎn)上,包括腦癱發(fā)生時(shí)的大腦損傷。