細(xì)胞：NPA細(xì)胞
中文名稱：人甲狀腺乳頭狀癌細(xì)胞
生長(zhǎng)特性：貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基：L15+10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間，通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液(每周 2-3 次)，待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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研究發(fā)現(xiàn)趨化因子似乎還能吸引干細(xì)胞到損傷位點(diǎn)。至少在腦癱動(dòng)物模型中，這種有治療功效的化合物僅在受傷后幾天存在于傷口。
正常情況下，在大腦損傷后會(huì)自然產(chǎn)生chemokines，并且是大腦自然修復(fù)過(guò)程的一部分，但可能由于產(chǎn)生的量不夠和持續(xù)產(chǎn)生時(shí)間不夠長(zhǎng)，所以不能達(dá)到治愈的效果。因此我們希望添加外源的趨化因子，以便在損傷發(fā)生長(zhǎng)時(shí)間后繼續(xù)促進(jìn)新細(xì)胞在傷口中的整合。
嘗試幾種直接的方法：包括將chemokines先注射到受損位點(diǎn)然后注射干細(xì)胞；以及兩種物質(zhì)同時(shí)注射。在注射前Carroll將會(huì)利用病毒感染細(xì)胞的能力將chemokines送入干細(xì)胞中。
盡管干細(xì)胞是未成熟的、可以分化成為各種細(xì)胞的多能細(xì)胞，但供體的干細(xì)胞可能會(huì)引發(fā)一種類似移植器官的免疫反應(yīng)。
使用免疫抑制劑環(huán)孢霉_素A來(lái)提高移植成功率，并與不用抑制劑的對(duì)照進(jìn)行比較成功率。他也會(huì)觀察是否這種動(dòng)物模型的動(dòng)作技能在移植后有所改善。
盡管認(rèn)為干細(xì)胞治療有一天會(huì)幫助恢復(fù)腦癱造成的大腦功能喪失，但還有許多問(wèn)題沒(méi)有找到答案。其中的一個(gè)問(wèn)題就是，這種不斷增殖的細(xì)胞是否會(huì)導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生。還有，腦癱是一種很復(fù)雜的疾病而不是一個(gè)單純的問(wèn)題，在這種疾病中最終可能所有的大腦細(xì)胞類型都需要修復(fù)。
