細(xì)胞:GC-1 spg細(xì)胞
中文名稱(chēng):小鼠精原細(xì)胞
生長(zhǎng)特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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貌不驚人的海螺體內(nèi)含有的一種化合物可阻止人類(lèi)胚胎干細(xì)胞分化為成熟細(xì)胞。
這一發(fā)現(xiàn)有助于控制干細(xì)胞的分化時(shí)機(jī),為干細(xì)胞療法的臨床應(yīng)用帶來(lái)了希望。
從海螺體內(nèi)提取了一種名為BIO的化合物。在將該化合物注入人類(lèi)胚胎干細(xì)胞后,干細(xì)胞的分化便停止了。
BIO很可能是激活了胚胎干細(xì)胞中一種叫作“WNT通道”的蛋白質(zhì)信號(hào),這種信號(hào)參與細(xì)胞的發(fā)育過(guò)程。此前曾有科學(xué)家報(bào)告,“WNT通道”可阻止造血干細(xì)胞的分化。
人類(lèi)胚胎干細(xì)胞是人類(lèi)胚胎中保留的未成熟細(xì)胞,它幾乎能分化為所有的人體細(xì)胞。因此,科學(xué)家一直試圖把人類(lèi)胚胎干細(xì)胞培育成不同的人類(lèi)組織并移植到患者體內(nèi)。
一些尚未解決的技術(shù)問(wèn)題使實(shí)現(xiàn)這個(gè)目標(biāo)的難度很大:首先,科學(xué)家不清楚控制胚胎干細(xì)胞分化的方式。
在采用目前的技術(shù)將胚胎干細(xì)胞培育為其他細(xì)胞的研究中,有時(shí)需要將人類(lèi)胚胎干細(xì)胞植入老鼠體內(nèi),以期培育出適合人類(lèi)使用的細(xì)胞或組織。這意味著人類(lèi)胚胎干細(xì)胞可能會(huì)被老鼠的蛋白質(zhì)污染。
目前,已開(kāi)始利用BIO控制干細(xì)胞分化的實(shí)驗(yàn),并已觀測(cè)到數(shù)次受到控制的細(xì)胞分裂。