細(xì)胞:HNEpC細(xì)胞
中文名稱:人鼻粘膜上皮細(xì)胞
生長特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴(yán)格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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軟組織肉瘤的研究動(dòng)向
軟組織肉瘤是一大類發(fā)生于骨和軟骨以外結(jié)締組織的惡性腫瘤。目前,世界范圍內(nèi)的軟組織肉瘤的細(xì)胞和分子遺傳學(xué)研究主要集中在兩個(gè)方向上:
一.研究染色體易位及相應(yīng)融合基因?qū)浗M織肉瘤的特異性,探討其臨床及病理診斷意義。
已對多種軟組織肉瘤進(jìn)行了研究,發(fā)現(xiàn)染色體易位對這些腫瘤有特異性診斷價(jià)值,并可以在常規(guī)病理診斷工作中開展,極大地推動(dòng)了軟組織肉瘤的診斷,并很好地指導(dǎo)臨床治療。
二.研究融合基因的功能,探討其對軟組織肉瘤的病因?qū)W意義,進(jìn)而研究其生物治療意義。
對尤文肉瘤、粘液脂肪肉瘤、腺泡狀橫紋肌肉瘤等的研究發(fā)現(xiàn),融合基因的表達(dá)對維持腫瘤的惡性表型有重要作用,部分融合蛋白還可使NIH 3T3細(xì)胞發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化。
表達(dá)粘液脂肪肉瘤的TLS-CHOP融合基因的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物會(huì)發(fā)生粘液脂肪肉瘤。這些研究提示,融合基因功能的研究有助于揭示軟組織肉瘤的發(fā)生機(jī)制。目前需要開展的是融合蛋白靶基因的研究,為潛在的生物治療提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。