細(xì)胞:NCCIT細(xì)胞
中文名稱:人畸胎癌細(xì)胞
生長(zhǎng)特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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在人類胚胎干細(xì)胞發(fā)現(xiàn)離子通道
人類胚胎干細(xì)胞是一類具有分化成身體中各種細(xì)胞類型潛能的“全能”細(xì)胞。研究發(fā)現(xiàn)人類胚胎干細(xì)胞(ESC)中存在功能性的離子通道。這些離子通道就好比電線,它容許ESC傳導(dǎo)和通過(guò)電流。
(CCC-HBE-2胚胎氣管細(xì)胞 種屬:人)
如果研究能夠有選擇性地阻斷由干細(xì)胞衍生而來(lái)的移植細(xì)胞中的一些通道,那么將能夠預(yù)防潛在的腫瘤的形成。 ESC移植治療的一個(gè)重要的問(wèn)題就是有可能因?yàn)橐恍┪捶只娜祟怑SC的污染導(dǎo)致經(jīng)改造的移植物在移植后混雜在一起并形成腫瘤。(CCC-HEK-1胚腎二倍體細(xì)胞 種屬:人)
功能性離子通道是細(xì)胞外膜中的閥門,它容許帶電的原子通過(guò)。在人類胚胎干細(xì)胞上發(fā)現(xiàn)功能性離子通道為人類胚胎干細(xì)胞的分化和細(xì)胞擴(kuò)增(或者叫做成熟和生長(zhǎng))提供了重要。(CCC-HEL-1胚腎二倍體細(xì)胞 種屬:人)
由于人類ESC有潛力為移植和細(xì)胞治療提供大量的一致的高特化的細(xì)胞,因此它們可能是解決細(xì)胞移植捐獻(xiàn)者有限的這個(gè)問(wèn)題的最終出路。
(CCC-HEH-2胚胎心肌細(xì)胞 種屬:人)
在先前的研究中,研究加工出了由人類ESC衍生而來(lái)的心臟細(xì)胞,并且證明能將大量的健康的特化細(xì)胞移植到受損的器官中。因?yàn)殡妱?shì)活動(dòng)能夠調(diào)節(jié)細(xì)胞的分化和擴(kuò)增,因此研究人員決定分析“萬(wàn)能”人類胚胎干細(xì)胞中是否有離子通道的存在。(CCC-HIE-2胚胎腸粘膜細(xì)胞 種屬:人)
研究中,他們首先測(cè)量了單個(gè)人類胚胎干細(xì)胞的電流,因而發(fā)現(xiàn)了若干容許和控制鉀離子通過(guò)的通道,而且還觀察到了電流對(duì)細(xì)胞分化和擴(kuò)增的影響。Li博士希望通過(guò)靶向特定的鉀離子通道能夠?yàn)檠芯咳藛T提供更多有關(guān)加工用于移植的健康細(xì)胞的信息。(CCC-HPE-2胚胎胰腺細(xì)胞 種屬:人)
他們還發(fā)現(xiàn)堵塞ESC中的鉀離子通道能夠減緩細(xì)胞的生長(zhǎng)。這些發(fā)現(xiàn)最終可能為人們提供抑制移植后不希望發(fā)生的細(xì)胞事件的遺傳策略。