細(xì)胞:C4-2細(xì)胞
中文名稱:人前列腺癌細(xì)胞
生長(zhǎng)特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:1640 培養(yǎng)基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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長(zhǎng)期以來(lái) ,人們一直認(rèn)為 ,成年哺乳動(dòng)物腦內(nèi)神經(jīng)細(xì)胞不具備更新能力 ,一旦受損乃至死亡 ,不能再生 ,這種觀點(diǎn)使人們對(duì)帕金森病、多發(fā)性硬化及腦脊髓損傷的治療受到了很大的限制。
雖然傳統(tǒng)的藥物及手術(shù)取得了一定的進(jìn)展 ,但是仍不能達(dá)到滿意的效果。近年來(lái) ,生物醫(yī)學(xué)技術(shù)迅猛發(fā)展 ,神經(jīng)生物學(xué)的重要進(jìn)展之一是發(fā)現(xiàn)神經(jīng)干細(xì)胞的存在 ,特別是成體腦內(nèi)神經(jīng)干細(xì)胞的分離和鑒定具有劃時(shí)代意義。
神經(jīng)干細(xì)胞的特點(diǎn):
神經(jīng)干細(xì)胞的特點(diǎn)如下:
?、偕窠?jīng)干細(xì)胞可以分化。
?、谕ㄟ^(guò)分裂產(chǎn)生相同的神經(jīng)干細(xì)胞來(lái)維持自身的存在 ,同時(shí) ,也能產(chǎn)生子細(xì)胞并進(jìn)一步分化成各種成熟細(xì)胞。干細(xì)胞可連續(xù)分裂幾代 ,也可在較長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)處于靜止?fàn)顟B(tài)。
③神經(jīng)干細(xì)胞通過(guò)兩種方式生長(zhǎng) ,一種是對(duì)稱分裂 ,形成兩個(gè)相同的神經(jīng)干細(xì)胞,另一種是非對(duì)稱分裂 ,由于細(xì)胞質(zhì)中的調(diào)節(jié)分化蛋白不均勻的分配 ,使得一個(gè)子細(xì)胞不可逆的走向分化的終端而成為功能專一的分化細(xì)胞 ,另一個(gè)子細(xì)胞則保持親代的特征 ,仍作為神經(jīng)干細(xì)胞保留下來(lái)。分化細(xì)胞的數(shù)目受分化前干細(xì)胞的數(shù)目和分裂次數(shù)控制。