細(xì)胞:HPDLC細(xì)胞
中文名稱:人牙周膜干細(xì)胞
生長(zhǎng)特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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細(xì)胞因子與神經(jīng)干細(xì)胞的增殖、分化密切相關(guān)
不同的細(xì)胞因子在神經(jīng)干細(xì)胞的誘導(dǎo)分化中起重要作用 ,但尚沒(méi)有一種細(xì)胞因子能在體外將神經(jīng)干細(xì)胞全部誘導(dǎo)分化為所需的功能神經(jīng)細(xì)胞 ,參與神經(jīng)干細(xì)胞誘導(dǎo)分化的細(xì)胞因子有白細(xì)胞介素類 ,如IL-1、IL-7、IL-9及IL-1 1等。RTE細(xì)胞 氣管上皮細(xì)胞 種屬:大鼠
神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子對(duì)神經(jīng)干細(xì)胞分化到終末細(xì)胞的整個(gè)過(guò)程均有影響 ,如果將培養(yǎng)的神經(jīng)干細(xì)胞置于腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子作用下 ,大量的神經(jīng)干細(xì)胞可以表現(xiàn)出分化神經(jīng)元的特性。
生長(zhǎng)因子類 ,如上皮生長(zhǎng)因子、神經(jīng)生長(zhǎng)因子及堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子等也影響神經(jīng)干細(xì)胞的分化。神經(jīng)干細(xì)胞對(duì)不同種類、不同濃度的因子 ,以及多種因子聯(lián)合應(yīng)用作用各不相同 ,在神經(jīng)干細(xì)胞發(fā)育分化的不同階段 ,相同因子的作用也不同。RYTF細(xì)胞 成纖維細(xì)胞 種屬:兔
如在表皮生長(zhǎng)因子及堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子存在的條件下 ,胚胎神經(jīng)干細(xì)胞主要向神經(jīng)元、星形膠質(zhì)細(xì)胞和少突膠質(zhì)細(xì)胞分化 ,而出生后及成年的腦神經(jīng)干細(xì)胞 ,則無(wú)論是否有上皮生長(zhǎng)因子及堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子 ,都主要分化為星形膠質(zhì)細(xì)胞。RTE細(xì)胞 氣管上皮細(xì)胞 種屬:大鼠
這些研究提示 ,上皮生長(zhǎng)因子及堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子對(duì)神經(jīng)干細(xì)胞向功能細(xì)胞的誘導(dǎo)分化是復(fù)雜的。
信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)在神經(jīng)干細(xì)胞分化中十分重要。作為一種信號(hào)傳導(dǎo)途徑 ,Notch信號(hào)傳導(dǎo)系統(tǒng)尚未完_全闡明。
目前認(rèn)為Notch受體是一種整合型膜蛋白 ,是一個(gè)保守的細(xì)胞表面受體 ,它通過(guò)與周圍配體接觸而被激活 ,其信號(hào)傳導(dǎo)途徑開(kāi)始于Notch受體與配體結(jié)合后其胞漿區(qū)從細(xì)胞膜上脫落 ,并向細(xì)胞核轉(zhuǎn)移 ,將信號(hào)傳遞給下游信號(hào)分子。RYTF細(xì)胞 成纖維細(xì)胞 種屬:兔
該途徑的信號(hào)傳遞主要是通過(guò)蛋白質(zhì)相互作用 ,引起轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子的改變或?qū)⑥D(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子結(jié)合到靶基因上 ,實(shí)現(xiàn)對(duì)特定基因轉(zhuǎn)錄的調(diào)控。293ET細(xì)胞 胚腎細(xì)胞 種屬:人
當(dāng)激活Notch途徑時(shí) ,干細(xì)胞進(jìn)行增殖 ,當(dāng)抑制Notch活性時(shí) ,干細(xì)胞進(jìn)入分化程序。這些研究結(jié)果表明找到調(diào)節(jié)Notch信號(hào)途徑的方式 ,就可能通過(guò)改變Notch信號(hào)來(lái)精確調(diào)控神經(jīng)干細(xì)胞向神經(jīng)功能細(xì)胞分化的過(guò)程和比例。此外 ,Janus激酶信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)遞質(zhì)與轉(zhuǎn)錄激活劑 (JAK-STAT)信號(hào)傳導(dǎo)系統(tǒng)也參與干細(xì)胞的調(diào)控。