細(xì)胞:TJ905細(xì)胞
中文名稱:人膠質(zhì)瘤細(xì)胞
生長(zhǎng)特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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白血病是一類造血干細(xì)胞惡性克隆性疾病,在兒科惡性腫瘤的發(fā)病率中居首,它的死亡率在導(dǎo)致兒童及35歲以下成年人死亡的惡性腫瘤中排首_位。
電離輻射是一個(gè)常見的致癌物,對(duì)白血病的發(fā)生非常關(guān)鍵。然而,其表觀學(xué)遺傳機(jī)制依然有很大一部分不為人知。
研究對(duì)小鼠胸腺中電離輻射(IR)引起的 micrornAome變化進(jìn)行了研究。
研究通過miRNA表達(dá)譜芯片分析(miRNA芯片項(xiàng)目由聯(lián)川生物承擔(dān)完成)鑒定小鼠胸腺中應(yīng)答輻射時(shí)差異表達(dá)的miRNAs,證實(shí)了在小鼠胸腺組織中IR能引起miR-27b差異表達(dá),且呈劑量、時(shí)間和性別依賴的方式。
在白血病細(xì)胞系CCL119和TIB152中,miR-27b表達(dá)被明顯抑制。有趣的是,ERα在上述兩個(gè)細(xì)胞系中過量表達(dá),并與miR-27b表達(dá)呈負(fù)相關(guān)。
研究發(fā)現(xiàn),β-雌二醇/ERα信號(hào)可能通過ERK1/2途徑,引起急性白血病細(xì)胞中miR-27b的表達(dá)下調(diào),miR-27b可能通過結(jié)合細(xì)胞周期蛋白A2抑制細(xì)胞增殖,起到腫瘤抑制的作用。
此研究證實(shí)了IR能引起miR-27b差異表達(dá),從而對(duì)白血病發(fā)生造成影響,為其表觀學(xué)遺傳機(jī)制提供了新見解,也為白血病的研究與治療提供了新思路。