常用抗體標(biāo)記熒光染料的特性及其應(yīng)用
1、FITC:激發(fā)波長(zhǎng)488nm,zui大發(fā)射波長(zhǎng)525nm。
1)其標(biāo)記的抗體適用于所有配備488nm氬離子激光器的流式細(xì)胞儀;
2)在流式細(xì)胞儀的FL1通道檢測(cè);
3)可用于熒光顯微鏡技術(shù)
4)熒光強(qiáng)度易受PH值影響,PH值降低時(shí)其熒光強(qiáng)度減弱。
2、Alexa Fluor 488:激發(fā)波長(zhǎng)488nm,zui大發(fā)射波長(zhǎng)519nm。
1)其標(biāo)記的抗體適用于所有配備488nm氬離子激光器的流式細(xì)胞儀;
2)在流式細(xì)胞儀的FL1通道檢測(cè);
3)具有超乎尋常的光穩(wěn)定性,非常適用于熒光顯微鏡技術(shù);
4)在較寬的PH值范圍內(nèi)保持穩(wěn)定(PH4~10)。
3、Cy3:激發(fā)波長(zhǎng)488nm,zui大發(fā)射波長(zhǎng)570nm。
1)其標(biāo)記的抗體適用于所有配備488nm氬離子激光器的流式細(xì)胞儀;
2)在流式細(xì)胞儀的FL2通道檢測(cè);
3)適用于熒光顯微鏡技術(shù);
4)為小分子染料,非常適合需小分子染料的流式細(xì)胞術(shù),熒光強(qiáng)度低于PE。
4、Cy5:激發(fā)波長(zhǎng)633/635nm,zui大發(fā)射波長(zhǎng)670nm。
1)其標(biāo)記的抗體適用于所有配備633nm氬離子激光器的流式細(xì)胞儀;
2)在流式細(xì)胞儀的FL4通道檢測(cè);
3)適用于熒光顯微鏡技術(shù);
4)同樣為小分子染料,非常適合需小分子染料的流式細(xì)胞術(shù),熒光強(qiáng)度低于APC。
5)與單核和粒細(xì)胞非特異性結(jié)合多,易出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果。
5、PE:激發(fā)波長(zhǎng)488nm,zui大發(fā)射波長(zhǎng)575nm。
1)其標(biāo)記的抗體適用于所有配備488nm氬離子激光器的流式細(xì)胞儀;
2)在流式細(xì)胞儀的FL2通道檢測(cè);
3)其熒光泯滅性強(qiáng),不適用于傳統(tǒng)的熒光顯微鏡技術(shù),但適用于激光共聚焦顯微鏡技術(shù)。
6、PE-TR:激發(fā)波長(zhǎng)488nm,zui大發(fā)射波長(zhǎng)615nm。
1)在Beckman Coulter流式細(xì)胞儀的FL3通道檢測(cè);
2)可適用于小功率激光器的流式細(xì)胞儀,也可使用于大功率激光器的大流式細(xì)胞儀。
7、PE-Alexa Fluor 610:激發(fā)波長(zhǎng)488nm,zui大發(fā)射波長(zhǎng)628nm。
1)在Beckman Coulter流式細(xì)胞儀的FL3通道檢測(cè);
2)熒光強(qiáng)度高;
3)可適用于小功率激光器的流式細(xì)胞儀,也可使用于大功率激光器的大流式細(xì)胞儀。
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