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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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胖大海LAMP鑒定試劑盒使用方法
2022-8-30 閱讀(74)
胖大海LAMP鑒定試劑盒使用方法：
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液，*用帶芯槍頭，下同）。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照（濃度為 1×10E8 拷貝/μL，試劑盒提供)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA，本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個(gè)樣品，則需要進(jìn)行 N+2 個(gè)樣品提取，多出的一個(gè)用作樣品制備陽性對照管、另一個(gè)用作樣品制備陰性對照管。
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)（20μL 體系，在樣品制備室進(jìn)行）
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù)，則標(biāo)記 N+9 個(gè) PCR 管，其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品，1 個(gè)用于 PCR 陰性對照（用水做模板），6 個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析，并且只做 1 次重復(fù)，則標(biāo)記 N+4 個(gè) PCR 管，其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品，1 個(gè)用于 PCR 陰性對照（用水做模板），1 個(gè)用于PCR 陽性對照（用第一步稀釋得到的標(biāo)準(zhǔn)曲線系列稀釋液的第 4 號做模板）。
活化轉(zhuǎn)錄因子6抗體
銜接蛋白β抗體
銜接蛋白γ/γ-Adaptin抗體
水通道蛋白-9抗體
膜粘連蛋白A3抗體
膜粘連蛋白 A4抗體
自噬相關(guān)蛋白8A抗體
磷酸化蛋白激酶B抗體
磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1抗體
磷酸化蛋白激酶B抗體
脫氧胞苷脫氨酶蛋白抗體
蛋白激酶錨定蛋白13抗體
AP-1μ2抗體
肥大細(xì)胞膜抑制性受體Allergin1抗體
腦鈉通道蛋白1抗體
肌動蛋白相關(guān)蛋白2/3復(fù)合亞單位B1抗體
三磷酸腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G超家族成員2抗體
甲胎蛋白抗體
毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)癥突變蛋白抗體
ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體
肌動蛋白結(jié)合蛋白LIM蛋白3抗體
酸性鈣調(diào)蛋白3抗體
磷酸化CD156b抗體
