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上海莼試生物技術(shù)有限公司

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小鼠elisa試劑盒操作進(jìn)程中的疑問形成假陽性

2018-5-17  閱讀(226)

1、加樣 :對于直接小鼠elisa試劑盒標(biāo)本通常都要進(jìn)行稀釋,假如加樣禁絕就會形成誤差,特別當(dāng)稀釋倍數(shù)大時,很小的誤差,會致使較大的相對誤差,使陰性(或弱陽性)標(biāo)本呈陽性(或陰性).加樣時應(yīng)將所加物加在ELISA板孔的底部,防止加在孔壁上部,并留意不行濺起,不行發(fā)生氣泡。
2、洗刷:在ELISA中準(zhǔn)確的洗刷是確保得到可重復(fù)成果的關(guān)健一步,應(yīng)引起操作者注重.無論是手工操作仍是機器操作,得出不準(zhǔn)確的成果常與不準(zhǔn)確的洗刷有關(guān),ELISA即是靠洗刷來到達(dá)別離游離和的酶符號物的意圖.經(jīng)過洗刷以消除殘留在板孔中沒能與固體抗原或抗體的物質(zhì),以及在反響進(jìn)程中非特異性吸附于固相載體的攪擾物質(zhì)。
3 、溫育 :每種試劑都有其反響形式,其中溫度和溫育時刻操控是主要要素.因孵育溫度高,反響時刻長,會形成整板本底高,陽性率高.溫育通常用濕盒或水浴,反響板不宜疊放,以確保各板溫度都能迅速平衡,為防止蒸騰,板上應(yīng)加蓋。
4、酶標(biāo)儀判讀 :作為記錄測定成果的儀器,酶標(biāo)儀的功能安穩(wěn)與否,決議成果的牢靠度.首要酶標(biāo)儀應(yīng)定時進(jìn)行養(yǎng)護(hù),對濾光片要定時校對;其次酶標(biāo)儀波長設(shè)置要準(zhǔn)確,運用雙波長,一個檢查波長,一個參比波長,以消除微孔板底部劃痕、不平、指印或液面高度區(qū)別形成的光攪擾.此外,在用酶標(biāo)儀讀數(shù)時先擦試微孔板底部并壓平板條。
綜上所述,因為酶聯(lián)免疫吸附技能現(xiàn)在在技能上缺乏標(biāo)準(zhǔn)化,雖然現(xiàn)在上以及我國有了部分標(biāo)準(zhǔn)血清或參比血清(血清盤).但因為受方法學(xué)及技能條件的約束,在小鼠elisa試劑盒酶聯(lián)吸附測定中有時不行防止的會呈現(xiàn)必定的非特異性,但咱們能夠經(jīng)過以上措施把非特異性顯色降至zui低限底,然后進(jìn)步檢查的特異性,并得到更準(zhǔn)確、牢靠的試驗成果。

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