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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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小鼠elisa試劑盒分光光度計定量測定操作
2018-7-5 閱讀(345)
在運用小鼠elisa試劑盒方法測定抗體方面，通常所用的方法稱為間接法，也是目前zui常用的方法，其原理：間接法首先用抗原包被于固相載體，這些包被的抗原必須是可溶性的，或者至少是極微小的顆粒，經(jīng)洗滌，加入含有被測抗體之標(biāo)本，再經(jīng)孵育洗滌后，加入酶標(biāo)記抗抗體，(對人的標(biāo)本來說即加酶標(biāo)抗人球蛋白IgG、IgM)，再經(jīng)孵育洗滌后，加底物顯色,底物降解的量，即為欲測抗體的量，其結(jié)果可用目測或用分光光度計定量測定。
操作步驟：
1.將抗原按5 μg/ml稀釋于碳酸鹽緩沖液(pH 9.6)，100 μl /孔，4℃過夜。
2.次日PBS－T清洗4次(快1慢3，間隔5分鐘)。
3.加2％BSA封閉室溫1 h，200 μl /孔。
4.陽性對照從10ug/ml，做倍必稀釋，待測血清從1：50做倍比稀釋，預(yù)試驗后確定稀釋倍數(shù)及陽性對照的起始濃度及稀釋數(shù)量（以可以做標(biāo)準(zhǔn)曲線為參數(shù)），室溫1h。
5.PBS－T清洗4次(快1慢3，間隔5分鐘)。
6.加入1：3000（不同公司有不同的稀釋度） PBS－T稀釋的HRP標(biāo)記的山羊抗人IgG，100 μl /孔，室溫1h。
7.PBS－T清洗4次(快1慢3，間隔5分鐘)。
8.小鼠elisa試劑盒顯色，100 μl /孔，顏色變深后中止顯色，2M硫酸在BIO－RAD酶標(biāo)儀上讀數(shù)，可用ABTS，OPD，TMB等
UV法含量測定用 馬來酸 對照品 171250-200401 50mg
HPLC法含量測定用 對照品 171252-200401 50mg
HPLC法含量測定 對照品 171253-200401 100mg
TLC法有關(guān)物質(zhì)檢查 2-氨基-2’,5-二氯二苯甲酮(雜質(zhì)B) 對照品 171254-200401 100mg
鑒別 鹽酸 對照品 171256-200401 100mg
含量測定 銀杏酸 對照品 20mg
Oleuropein 橄欖苦苷 橄欖苦甙 32619-42-4 HPLC≥98% 20mg/支
Lobetyolin 黨參炔苷 黨參炔甙 136085-37-5 HPLC≥98% 10mg/支
Carnosic acid 鼠尾草酸 639426 HPLC≥98% 20mg/支
小鼠elisa試劑盒
