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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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小鼠神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白1elisa試劑盒樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備
2020-3-12 閱讀(137)
小鼠神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白1elisa試劑盒樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
1血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右2000-3000轉(zhuǎn)/分。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
2血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右2000-3000轉(zhuǎn)/分。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
3尿液：
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右2000-3000轉(zhuǎn)/分。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
4細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右2000-3000轉(zhuǎn)/分。仔細(xì)收集上清。
5培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBSPH7.2-7.4稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右2000-3000轉(zhuǎn)/分。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
6組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBSPH7.4，或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右2000-3000轉(zhuǎn)/分。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。
