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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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脫落酸（ABA）含量ELISA測試盒操作流程
2020-5-7 閱讀(325)
脫落酸(ABA)含量ELISA測試盒操作流程：
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；
3. 樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。
4. 除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。
6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。
本試劑盒應用間接競爭法測定標本中脫落酸含量。用純化的脫落酸標準品包被微孔板，制成固相抗原。樣品中脫落酸與固相抗原競爭抗體，再利用HRP標記的二抗催化底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)
化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的脫落酸含量呈負相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中脫落酸濃度。
