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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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大鼠磷酸化AKT蛋白（P-AKT）Elisa試劑盒使用說明書
2017-6-8 閱讀(351)
| 提 供 商 | 上海莼試生物技術(shù)有限公司 | 資料大小 | 45.6KB |
|---|---|---|---|
| 資料圖片 | 下載次數(shù) | 14次 | |
| 資料類型 | JPG 圖片 | 瀏覽次數(shù) | 351次 |
大鼠磷酸化AKT蛋白（P-AKT）Elisa試劑盒實驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠磷酸化 AKT 蛋白（P-AKT）水平。用純化
的大鼠磷酸化 AKT 蛋白（P-AKT）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入磷酸化AKT 蛋白（P-AKT） ，再與HRP 標記的磷酸化AKT 蛋白（P-AKT）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過*洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的磷酸化AKT 蛋白（P-AKT）呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中大鼠磷酸化AKT 蛋白（P-AKT）濃度
大鼠磷酸化AKT蛋白（P-AKT）Elisa試劑盒操作步驟
1. 標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
80ng/L 5 號標準品 150µl的原倍標準品加入150µl標準品稀釋液
40ng/L 4 號標準品 150µl的5 號標準品加入150µl標準品稀釋液
20ng/L 3 號標準品 150µl的4 號標準品加入150µl標準品稀釋液
10ng/L 2 號標準品 150µl的3 號標準品加入150µl標準品稀釋液
5ng/L 1 號標準品 150µl的2 號標準品加入150µl標準品稀釋液
2. 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同） 、標準孔、待測樣品孔。 在酶標包被板上標準品準確加樣50µl， 待測樣品孔中先加樣品稀釋液40µl，
然后再加待測樣品10µl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡
量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液：將30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水30 倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此重復 5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標試劑50µl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50µl，再加入顯色劑B50µl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15 分鐘.
10. 終止：每孔加終止液 50µl，終止反應（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色） 。
11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD 值） 。 測定應在加終止液后 15分鐘以內(nèi)進行。
人胰腺癌標志物CA242ELISA試劑盒 進口/分裝 英文名稱： Human Pancreatic carcinoma markers-CA242 ELISA Kit 規(guī)格: 96T/48T
人胃腸癌標志物CA199ELISA試劑盒 進口/原裝 英文名稱： Human Gastrointestinalcancer Marker-CA199 ELISA Kit 規(guī)格: 96T/48T
人卵巢癌標志物CA125ELISA試劑盒 * 英文名稱： Human ovarian cancer marker-CA125 ELISA Kit 規(guī)格: 96T/48T
人甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA試劑盒 進口/分裝 英文名稱： Human Alpha-fetoprotein，AFP ELISA Kit 規(guī)格: 96T/48T
人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)ELISA試劑盒 進口/原裝 英文名稱： Human tissue inhibitors of metalloproteinase 4，TIMP-4 ELISA Kit 規(guī)格: 96T/48T
人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)ELISA試劑盒 * 英文名稱： Human tissue inhibitors of metalloproteinase 3，TIMP-3 ELISA Kit 規(guī)格: 96T/48T
人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)ELISA試劑盒 * 英文名稱： Human tissue inhibitors of metalloproteinase 2，TIMP-2 ELISA Kit 規(guī)格: 96T/48T
人抑瘤素M(OSM)ELISA試劑盒 進口/分裝 英文名稱： Human Oncostatin-M，OSM ELISA Kit 規(guī)格: 96T/48T
人表面活性蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒 進口/原裝 英文名稱： Human Surfactant Protein A，SP-A ELISA Kit 規(guī)格: 96T/48T
人肺表面活性物質(zhì)相關蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒 * 英文名稱： Human Pulmonary surfatcant-associated protein A，SP-A ELISA Kit 規(guī)格: 96T/48T
人轉(zhuǎn)酶2C多肽(TGM2)ELISA試劑盒 * 英文名稱： human tranGSlutaminase 2C polypeptide，TGM2 ELISA Kit 規(guī)格: 96T/48T
人Ⅰ型前膠原N端前肽(PⅠNP)ELISA試劑盒 進口/分裝 英文名稱： Human procollagen Ⅰ N-terminal peptide，PⅠNP ELISA Kit 規(guī)格: 96T/48T
人Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(ⅠCTP)ELISA試劑盒 進口/原裝 英文名稱： Human Cross-linked Carboxy-terminal opeptide of type Ⅰ collagen，ⅠCTP ELISA Kit 大鼠磷酸化AKT蛋白（P-AKT）Elisa試劑盒規(guī)格: 96T/48T
