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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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大鼠elisa試劑盒應(yīng)用定性夾心免疫檢測技術(shù)
2018-2-23 閱讀(122)
大鼠elisa試劑盒應(yīng)用定性夾心免疫檢測技術(shù)
（1）將特異性抗體與固相載體連接，形成固相抗體：洗滌除去未結(jié)合的抗體及雜質(zhì)。
（2）加受檢標(biāo)本：使之與固相抗體接觸反應(yīng)一段時(shí)問，讓標(biāo)本中的抗原與固相載體上的抗體結(jié)合，形成固相抗原復(fù)合物。洗滌除去其他未結(jié)合的物質(zhì)。
（3）加酶標(biāo)抗體：使固相免疫復(fù)合物上的抗原與酶標(biāo)抗體結(jié)合。*洗滌未結(jié)合的酶標(biāo)抗體。此時(shí)固相載體上帶有的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量成正相關(guān)。
（4）加底物：夾心式復(fù)合物中的酶催化底物成為有色產(chǎn)物。根據(jù)顏色反應(yīng)的程度進(jìn)行該抗原的定性或定量。
根據(jù)同樣原理，將大分子抗原分別制備固醫(yī)學(xué)教丨育網(wǎng)整理相抗原和酶標(biāo)抗原結(jié)合物，即可用雙抗原夾心法測定標(biāo)本中的抗體。
用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板條，這些多肽是中國型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很強(qiáng)的肽段，分別來自于該毒株的開放閱讀框2和開放閱讀框3。
將樣品或標(biāo)準(zhǔn)品加入孔中并孵育，如果其中存在HEV IgM抗體，這些抗體就會(huì)與HEV 的多肽抗原結(jié)合，并固定在上面，洗板除去其它非特異性抗體和樣品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP（辣根過氧化物酶）酶結(jié)合物，經(jīng)第二次孵育后，酶結(jié)合物就會(huì)與*次孵育結(jié)合上的HEV IgM抗體相結(jié)
合，洗板除去未結(jié)合的酶結(jié)合物，加入TMB底物溶液。
大鼠elisa試劑盒酶在第三次孵育時(shí)會(huì)發(fā)生酶-底物反應(yīng)，只有那些含有HEV IgM抗體和酶結(jié)合物所形成的復(fù)合物的孔才會(huì)發(fā)生顏色變化，加入硫酸溶液終止酶和底物間的反應(yīng)，并在波長: 450nm處測量O.D.值,按照本HEV IgM抗體elisa試劑盒的測試標(biāo)準(zhǔn), O.D.值大于或等于Cut-Off值的樣品被認(rèn)為是初試陽性。
E2 tag標(biāo)簽IgG 小鼠載脂蛋白H(Apo-H)
EB病毒核抗原-3IgG 小鼠載脂蛋白E(Apo-E)
eIF4E結(jié)合蛋白2 小鼠載脂蛋白B100(apo-B100)
eIF4E結(jié)合蛋白2IgG 小鼠載脂蛋白A1(apo-A1)
ELAVL1IgG 小鼠孕酮受體(PROGR)
Eph receptor B2IgG 小鼠孕激素/孕酮(PROG)
ESAIgG(標(biāo)記) 小鼠鑰孔蟲戚血藍(lán)蛋白(KLH)
Ets轉(zhuǎn)錄因子家族e(cuò)ts1IgG 小鼠誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶(iNOS)
E-鈣粘附分子IgG 小鼠游離脂肪酸(FFA)
E選擇素IgG 小鼠游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3)
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