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參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：大豆內(nèi)源基因（Lectin）定性PCR檢測試劑盒
產(chǎn)品貨號：CP100168
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品分類：PCR法
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:

實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
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二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1（10pM）               2μl
      引物2（10PM）              2μl
      Taq酶（2U/μl）            1μl
      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
     加ddH2O至               50 μl
     視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
實驗注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括定量和相對定量）和定性分析。
主要服務：DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
釀酒酵母9號染色體開放閱讀框61抗體Human ALDOA(Aldolase A, Fructose Bisphosphate) ELISA Kit人可溶性胸苷激酶1(TK1)免疫試劑盒

黑曲霉C末端結(jié)合蛋白2抗體Human Anti-AChR(Anti-Acetylcholine Receptor Antibody) ELISA Kit人可溶性凝集素樣氧化低密度脂蛋白受體1(sLOX-1)免疫試劑盒

灰孔多年臥孔菌21號染色體開放閱讀框13抗體Human ALP(Alkaline Phosphatase) ELISA Kit人可溶性間皮素相關肽(SMRP)免疫試劑盒

漏斗狀側(cè)耳冠蛋白3抗體Human AMA IgA(Anti-Myelin antibody IgA) ELISA Kit人可溶性核因子κB受體活化因子(sRANK)免疫試劑盒

釀酒酵母周期蛋白N端結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體Human anti AMPH(anti amphiphysin) ELISA Kit人可溶性前體蛋白α(sAPPα)免疫試劑盒

糙皮側(cè)耳膽固25羥化酶抗體Human ANG I(Angiotensin I) ELISA Kit人可溶性彈性蛋白片段(sELAF)免疫試劑盒

佐久氏沙雷氏菌天冬氨酸-特異性蛋白酶家族抗體Human ANG II(Angiotensin II) ELISA Kit人可溶性補體激活產(chǎn)物SC5b9 免疫試劑盒

總狀毛霉鈣營養(yǎng)蛋白1/鈣結(jié)合蛋白8抗體Human AMPK(Phosphorylated Adenosine Monophosphate Activated Protein Kinase) ELISA Kit人可溶性白介素7受體(sIL-7R)免疫試劑盒

釀酒酵母鈣結(jié)合蛋白5/3抗體Human anti AMPH(anti amphiphysin) ELISA Kit人可溶性P選擇素(sP-selectin)免疫試劑盒

稻黑孢霉CD98輕鏈抗體Human ANG I(Angiotensin I) ELISA Kit人可溶性OX40L(sOX40L)免疫試劑盒

缺陷短波單胞菌胰輔脂酶抗體Human AMPK(Phosphorylated Adenosine Monophosphate Activated Protein Kinase) ELISA Kit人可溶性Endoglin(sENG/sCD105)免疫試劑盒

無17號染色體開放閱讀框104抗體Human ADRP(Adipose Differentiation Related Protein) ELISA Kit人可溶性CD86(B7-2/sCD86)免疫試劑盒

靈芝(紅芝，赤芝)（可訂購）卡因和調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄蛋白抗體Human A-GHR(Acylated Ghrelin) ELISA Kit人可溶性CD80(sCD80)免疫試劑盒

孟氏假單胞菌富半肝素結(jié)合蛋白61抗體Human AGGF1(Angiogenic Factor with G Patch and FHA Domains 1) ELISA Kit人可溶性CD44變體9(sCD44-v9)免疫試劑盒

孢吸水鏈霉菌2號染色體開放閱讀框65抗體Human his(Histamine) ELISA Kit人可溶性CD40配體(sCD40L)免疫試劑盒

白井盤多毛孢β連環(huán)蛋白樣蛋白1抗體Human his(Histamine) ELISA Kit人可溶性CD40免疫試劑盒
大豆內(nèi)源基因（Lectin）定性PCR檢測試劑盒北極海單胞菌Marinomonas│arctica 質(zhì)量規(guī)格：≥160 CDU/mg,Sigma分裝蛋白基因產(chǎn)物9.5試劑盒皂皮酸

枯草芽孢桿菌枯草亞種Bacillus│subtilis subsp. subtilis 質(zhì)量規(guī)格：>99%,AR蛋白二硫化物異構(gòu)酶A3試劑盒美商陸酸

釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格：>98%蛋白S試劑盒介芬

胎兒別樣謝瓦氏菌Alishewanella│fetalis 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR蛋白C試劑盒甜菊

乳酒假絲酵母Candida│kefyr 質(zhì)量規(guī)格：>99%,AR蛋白ATP1B4試劑盒山竹子素

泊庫島食烷菌Alcanivorax│borkumensis 質(zhì)量規(guī)格：AR蛋白試劑盒異桑葉生物堿

擬諾卡氏菌Nocardiopsis│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>99.5%,AR蛋白 DJ-1試劑盒依洛替康

五通橋毛霉Mucor│wutungkiao 質(zhì)量規(guī)格：>99.5%,AR蛋氨酸-R-亞砜還原酶 B2,線粒體試劑盒洋地黃苷

球孢鏈霉菌球孢亞種Streptomyces│globisporus subsp. globisporus (Krassilnikov) Waks 質(zhì)量規(guī)格：BR彈性蛋白酶2，中性粒試劑盒纖精酮
使用方法：
一、樣品DNA的制備
用自選方法提取細菌樣品DNA。注意：DNA純化方法是決定檢測靈敏度的關鍵因素。如果不能很好純化樣品DNA，后面的PCR再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備O157:H7標準曲線（以10-10E6這6個10倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。
1. 標記6個離心管，分別為6，5，4，3，2和1號。
2. 用帶芯槍頭分別加入45 μL超純水（用帶芯槍頭，下同）。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用TE緩沖液或超純水10倍梯度稀釋到10E7拷貝/μL（注：請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至10E7拷貝/μL，建議每次稀釋10倍，梯度稀釋至10E7拷貝/μL）。
4. 在6號管中加入5 μL 10E7拷貝/μL的O157:H7陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘，得10E6拷貝/μL的陽性對照。
5. 換槍頭，從6號管中取5 μL溶液到5號管中，充分震蕩1分鐘，得10E5拷貝/μL的陽性對照。
6. 換槍頭，從5號管中取5 μL溶液到4號管中，重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。
7. NC管中不加任何陽性對照。
8. 從1-6號管中分別取5 μL和待測樣品一起進行定量PCR（見下步），每個樣品做3次重復。PCR后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光PCR Ct值，并以之為縱軸，以濃度的對數(shù)值為橫軸，繪制標準曲線。