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保藏亦稱礦物油保藏法,定期移植保藏法的輔助方法。是指將菌種接種在適宜的斜面培養(yǎng)基上，條件下培養(yǎng)至菌種長出健壯菌落后注入滅菌的液體石蠟，使其覆蓋整個斜面，再直立放置于低溫（4～6℃）干燥處進(jìn)行保存的一種菌種保藏方法。

低溫存法：

①簡單保存法，將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時(shí)間不超過1～2個月，若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時(shí)間可達(dá)3～4個月；②液氮超低溫保存法，將生長穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中，密封于安瓿管內(nèi)，然后控制冷卻速度，使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí)，即可置于-150～-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物，都可用此法長期保存。

菌種的使用范圍:

（1）合成培養(yǎng)基。合成培養(yǎng)基的各種成分*是已知的各種化學(xué)物質(zhì)。這種培養(yǎng)基的化學(xué)成分清楚，釀酒酵母菌組成成分精確，重復(fù)性強(qiáng)，而且微生物在這類培養(yǎng)基中生長較慢。如高氏一號合成培養(yǎng)基、察氏（Czapek）培養(yǎng)基等。

（2）天然培養(yǎng)基。由天然物質(zhì)制成，如蒸熟的馬鈴薯和普通牛肉湯，前者用于培養(yǎng)霉菌，后者用于培養(yǎng)細(xì)菌。這類培養(yǎng)基的化學(xué)成分很不恒定，也難以確定，但配制方便，營養(yǎng)豐富，培養(yǎng)效果好，所以常被采用。

（3）半合成培養(yǎng)基。在天然有機(jī)物的基礎(chǔ)上適當(dāng)加入已知成分的無機(jī)鹽類，或在合成培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加某些天然成分，如培養(yǎng)霉菌用的馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基。這類培養(yǎng)基能更有效地滿足微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的需要。

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費(fèi)格森埃希菌硝根離子(NO4-)標(biāo)準(zhǔn)溶液500mg/L，溶劑：水Anti-Agtr1/AT1a/FITC  熒光素標(biāo)記血管組織血管緊張素Ⅱ1型受體抗體IgG豚鼠蕈堿型乙酰受體亞型M2(M-AChRM2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

硝根離子(NO5-)標(biāo)準(zhǔn)溶液1000μg/ml,溶劑:水Anti-AGER/Gold  金離子標(biāo)記的晚期糖化終末產(chǎn)物特異性受體抗體豚鼠受體(VDR)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

硝根離子(NO6-)標(biāo)準(zhǔn)溶液100μg/ml,溶劑:水Anti-Aryl Hydrocarbon Receptor/FITC  熒光素標(biāo)記芳香烴受體抗體IgG豚鼠白介素2受體α(IL-2Rα/CD25)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

釹標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/mlAnti-Aryl Hydrocarbon Receptor/FITC  熒光素標(biāo)記芳香烴受體抗體IgG豚鼠脫氫表雄酮硫酯(DHEA-S)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

釹標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/mL，體：10%HClAnti-AIF/FITC  熒光素標(biāo)記Anti-AIF抗體IgG豚鼠受體TNFRSF結(jié)合絲氨蘇氨激2(RIPK2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

總氮標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/mlAnti-AIF/FITC  熒光素標(biāo)記調(diào)亡誘導(dǎo)因子抗體IgG豚鼠過氧化物體生物合成因子2 (PEX2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

硝鹽氮標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/mlAnti-A/H1N1-M2 Human/Gold  膠體金標(biāo)記兔抗人A型流感病H1N1-M2抗體IgG豚鼠叉頭框蛋白C1(FOXC1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

亞硝鹽氮標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/mlAnti-A/H1N1-M2 Human/Gold  膠體金標(biāo)記兔抗人A型流感病H1N1-M2抗體IgG豚鼠轉(zhuǎn)膠蛋白(TAGLN)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

亞硝鹽氮標(biāo)準(zhǔn)溶液 100mg/L(以N計(jì))，體：水Anti-AIMP2/JTV1/FITC  熒光素標(biāo)記抗AIMP2抗體IgG豚鼠鐵調(diào)素(Hepc)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

銨氮標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/mlAnti-AK-1/FITC  熒光素標(biāo)記腺苷激-1抗體IgG豚鼠載脂蛋白F(ApoF)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

一氧化二氮標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/mlAnti-ADK/adenylate kinase/FITC   熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠腺苷激抗體IgG豚鼠普列克底物蛋白同源物樣結(jié)構(gòu)域家族A成員2(PHLDA2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

鋨標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/mlAnti-AKAP95/AKAP8 /FITC  熒光素標(biāo)記蛋白激A錨定蛋白95抗體IgG豚鼠促狀胚胎因子(TEF)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

總有機(jī)碳（TOC）標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000mg/L，體：水Anti-AKT2/FITC  熒光素標(biāo)記蛋白激B2抗體IgG豚鼠G蛋白偶聯(lián)受體120(GPR120)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/mlAnti-phospho-Akt/FITC  熒光素標(biāo)記抗化蛋白激B抗體IgG豚鼠生長因子受體結(jié)合蛋白10(Grb10)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

標(biāo)準(zhǔn)溶液 500mg/L，溶劑：水Anti-CEA/Gold  膠體金標(biāo)記癌胚抗原抗體IgG豚鼠孤腓肽(OFQ/N)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

操作步驟如下：

1 液體石蠟的準(zhǔn)備 選用優(yōu)質(zhì)化學(xué)純液體石蠟，將液體石蠟分裝加塞，用牛皮紙包好，采用以下兩種方式進(jìn)行滅菌：121℃濕熱滅菌30min，置40℃恒溫箱中蒸發(fā)水分，經(jīng)無菌檢查后備用。160℃干熱滅菌2個小時(shí)，冷卻后，經(jīng)無菌檢查后備用。

2 斜面培養(yǎng)物的制備   參照定期移植法。

3 灌注石蠟  將無菌的液體石蠟在無菌條件*入培養(yǎng)好的新鮮斜面培養(yǎng)物上,液面高出斜面頂部1cm左右，使菌體與空氣隔絕。

4 保藏 4.1　注入液體石蠟的菌種斜面以直立狀態(tài)置低溫（4～6℃）干燥處保藏，保藏時(shí)間2～10年。 4.2　保藏期間應(yīng)定期檢查，如培養(yǎng)基露出液面，應(yīng)及時(shí)補(bǔ)充無菌的液體石蠟。

5 恢復(fù)培養(yǎng)   恢復(fù)培養(yǎng)時(shí)，挑取少量菌體轉(zhuǎn)接在適宜的新鮮培養(yǎng)基上，生長繁殖后，再重新轉(zhuǎn)接一次。