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上海莼試生物技術(shù)有限公司

主營產(chǎn)品: ELISA試劑盒,ELISA試劑盒價(jià)格,ELISA試劑盒報(bào)價(jià)

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您現(xiàn)在的位置: 上海莼試生物技術(shù)有限公司>>PCR檢測試劑盒>>恒溫?zé)晒夥?/a>>> 48T豬偽狂犬病毒(PRV)PCR檢測試劑盒

公司信息

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48T豬偽狂犬病毒(PRV)PCR檢測試劑盒
豬偽狂犬病毒(PRV)PCR檢測試劑盒
參考價(jià) 面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 型號 48T
  • 品牌 其他品牌
  • 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
  • 所在地 上海市

更新時間:2021-07-16 11:15:45瀏覽次數(shù):440

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【簡單介紹】
豬偽狂犬病毒(PRV)PCR檢測試劑盒公司相關(guān)產(chǎn)品:
灰綠犁頭霉Absidia│glauca 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品茴芹內(nèi)酯
志賀氏菌Shigella│sp. 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,98.5%甘露
嗜堿假單胞菌Pseudomonas│alcaliphila 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品對羥基苯酸酯(尼泊爾金酯)

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參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:豬偽狂犬病毒(PRV)PCR檢測試劑盒
產(chǎn)品貨號:CP100172
產(chǎn)品規(guī)格:48T
產(chǎn)品分類:恒溫?zé)晒夥?/font>
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1

實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1(10pM)               2μl
      引物2(10PM)              2μl
      Taq酶(2U/μl)            1μl
      DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
     加ddH2O至               50 μl
     視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
使用方法:
一、樣品DNA的制備
用自選方法提取細(xì)菌樣品DNA。注意:DNA純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品DNA,后面的PCR再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備O157:H7標(biāo)準(zhǔn)曲線(以10-10E6這6個10倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記6個離心管,分別為6,5,4,3,2和1號。
2. 用帶芯槍頭分別加入45 μL超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用TE緩沖液或超純水10倍梯度稀釋到10E7拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至10E7拷貝/μL,建議每次稀釋10倍,梯度稀釋至10E7拷貝/μL)。
4. 在6號管中加入5 μL 10E7拷貝/μL的O157:H7陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得10E6拷貝/μL的陽性對照。
5. 換槍頭,從6號管中取5 μL溶液到5號管中,充分震蕩1分鐘,得10E5拷貝/μL的陽性對照。
6. 換槍頭,從5號管中取5 μL溶液到4號管中,重復(fù)上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。
7. NC管中不加任何陽性對照。
8. 從1-6號管中分別取5 μL和待測樣品一起進(jìn)行定量PCR(見下步),每個樣品做3次重復(fù)。PCR后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光PCR Ct值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
實(shí)時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
五通橋毛霉CD9蛋白抗體Human DPEP1(Dipeptidase 1) ELISA Kit人抗血小板抗體(anti-PA Ab)免疫試劑盒

球型接合酵母CD23/FcεRII抗體Human IFNA8(Interferon alpha-8) ELISA Kit人抗胸腺球蛋白(ATG)免疫試劑盒

地衣芽孢桿菌CD27抗體Human PRNP(Major prion protein) ELISA Kit人抗信號識別顆粒54kDa蛋白(SRP54)抗體免疫試劑盒

釀酒酵母CD30抗體Human S100A10(Protein S100-A10) ELISA Kit人抗心磷脂抗體IgM(ACA-IgM)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌CD43抗體Human STAT5B(Signal transducer and activator of transcription 5B) ELISA Kit人抗心磷脂抗體IgG(ACA-IgG)免疫試劑盒

葡萄擬莖點(diǎn)霉CD48抗體Human FZD4(Frizzled-4) ELISA Kit人抗心磷脂抗體IgA(ACA-IgA)免疫試劑盒

灰葡萄孢(測序正確)CD44抗體Human UBQLN1(Ubiquilin-1) ELISA Kit人抗心肌抗體(AMA)免疫試劑盒

根瘤菌整合素αX抗體Human NFKB2(Nuclear factor NF-kappa-B p100 subunit) ELISA Kit人抗心肌β1受體(MB1R)自身抗體免疫試劑盒

鹽地喜鹽芽孢桿菌表面趨化因子受體5抗體Human CCDC82(Coiled-coil domain-containing protein 82) ELISA Kit人抗小鼠抗體(HAMA)免疫試劑盒

根霉菌CD2抗體Human APOC4(Apolipoprotein C-IV) ELISA Kit人抗小腦(CE)自身抗體免疫試劑盒

*豬苓C-肽抗體Human S100A2(Protein S100-A2) ELISA Kit人抗小核糖核蛋白/Sm(snRNP/Sm)抗體免疫試劑盒

粘質(zhì)沙雷氏菌鈣結(jié)合蛋白抗體Human COMT(Catechol O-methyltransferase) ELISA Kit人抗線粒體抗體M2亞型(AMA-M2)免疫試劑盒

丁香鏈霉菌C-反應(yīng)蛋白抗體Human CCT8L1P(Putative T-complex protein 1 subunit theta-like 1) ELISA Kit人抗線粒體抗體(AMA)免疫試劑盒

蘋果鏈格孢C-反應(yīng)蛋白單克隆抗體Human DHFR(Dihydrofolate reductase) ELISA Kit人抗紋狀體(ST)自身抗體免疫試劑盒

盤長孢狀盤孢環(huán)腺苷酸應(yīng)答元件結(jié)合蛋白抗體Human IFNA10(Interferon alpha-10) ELISA Kit人抗胃壁抗體(AGPA/PCA)免疫試劑盒

德沃斯氏菌促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子抗體Human IFNA8(Interferon alpha-8) ELISA Kit人抗尾狀核(CN)自身抗體免疫試劑盒
豬偽狂犬病毒(PRV)PCR檢測試劑盒: 螺旋鏈霉菌 質(zhì)量規(guī)格:M.W:2000催乳素試劑盒Celgosivir



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