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參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)定性PCR檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品貨號(hào)：CP100131
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品分類：RT-PCR法
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點(diǎn)：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開(kāi)發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

實(shí)驗(yàn)過(guò)程：
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無(wú)到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
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二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1（10pM）               2μl
      引物2（10PM）              2μl
      Taq酶（2U/μl）            1μl
      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
     加ddH2O至               50 μl
     視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃保存。
4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào)；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，最后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括定量和相對(duì)定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
大腸埃希菌1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框159抗體Human PLCγ1(Phospholipase C Gamma 1) ELISA Kit人絲蟲(chóng)病抗體(IgG4)免疫試劑盒

糙皮側(cè)耳1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框162抗體Human PLB(Phospholipase B) ELISA Kit人肽酶抑制劑,Kazal 1型(SPINK1)免疫試劑盒

食油假單胞菌1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框163抗體Human PKC(Protein Kinase C) ELISA Kit人肽酶2甘露聚糖結(jié)合凝集素(MASP2)免疫試劑盒

1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框122抗體Human PLCγ2(Phospholipase C Gamma 2, Phosphatidylinositol Specific) ELISA Kit人蛋白酶抑制因子肽酶抑制因子進(jìn)化枝3G(Serpina3g)免疫試劑盒

亮白曲霉1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框123抗體Human PKR1(Prokineticin Receptor 1) ELISA Kit人蛋白酶HTRA1(HTRA1)免疫試劑盒

烏克蘭毛霉1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框124抗體Human PFKP(Phosphofructokinase, Plaet) ELISA Kit人/激酶24(STK24)免疫試劑盒

短柄帚霉2號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框3抗體Human PGAM1(PhosphoglyceRate Mutase 1) ELISA Kit人/蛋白磷酸酶(STK)免疫試劑盒

鼠李糖乳桿菌1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框127抗體Human PKR2(Prokineticin Receptor 2) ELISA Kit人/蛋白激酶PAK4(PAK4)免疫試劑盒

產(chǎn)氣腸桿菌*1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框129抗體Human PL(Placental Lactogen) ELISA Kit人/蛋白激酶B-raf(BRAF)免疫試劑盒

新疆鹽單胞菌1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框130抗體Human PLA1(Phospholipase A1) ELISA Kit人瞬態(tài)電壓感受器陽(yáng)離子通道,子類V,成員4(TrpV4)免疫試劑盒

禾谷鐮孢菌1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框131抗體Human PGF2α(Prostaglandin F2α) ELISA Kit人瞬態(tài)電壓感受器陽(yáng)離子通道,子類V,成員1(TrpV1)免疫試劑盒

總狀共頭霉1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框135抗體Human PGD2S(Prostaglandin D2 Synthase, Brain) ELISA Kit人瞬時(shí)受體電位陽(yáng)離子通道,亞科C,成員6(TRPC6)免疫試劑盒

大孢聯(lián)軛霉1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框141抗體Human PLA2G10(Phospholipase A2, Group X) ELISA Kit人水閘蛋白14(CLDN14)免疫試劑盒

黑曲霉1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框144抗體Human PLA2G12B(Phospholipase A2, Group XII B) ELISA Kit人水通道蛋白5(AQP-5)免疫試劑盒

圍小叢殼COPA蛋白抗體Human PLA2G4D(Phospholipase A2, Group IV D) ELISA Kit人水通道蛋白4抗體(AQP-4 Ab)免疫試劑盒

1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框185抗體Human PGRP-S(Peptidoglycan Recognition Protein-S) ELISA Kit人水通道蛋白3(AQP-3)免疫試劑盒
牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)定性PCR檢測(cè)試劑盒伊拉克固氮螺菌Azospirillum irakense 質(zhì)量規(guī)格：BR,鉑含量 ≥46%,原始鉑粉純度＞99.95% 胱天蛋白酶9試劑盒蘆丁(+)-三水合蕓香苷-對(duì)照品;有報(bào)告

曲霉屬Aspergillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品胱天蛋白酶8試劑盒靛藍(lán);有報(bào)告-對(duì)照品;有報(bào)告

霍氏腸桿菌Enterobacter│hormaechei 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品胱天蛋白酶-5試劑盒沒(méi)食子酸-對(duì)照品;有報(bào)告

熒光假單胞菌Pseudomonas│fluorescens 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品胱天蛋白酶3試劑盒黃芪甲苷（黃芪皂苷IV）-對(duì)照品;有報(bào)告

釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品胱天蛋白酶12試劑盒甲素（內(nèi)酯）-對(duì)照品;有報(bào)

大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品胱天蛋白酶10試劑盒野百合堿(豬屎豆堿)-對(duì)照品;有報(bào)告

氯生鏈霉菌Streptomyces│chlorobiens 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品胱天蛋白酶1試劑盒冬凌草甲素-對(duì)照品;有報(bào)告

托姆青霉Penicillium│thomii 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品胱硫β-合酶試劑盒D-果糖;標(biāo)準(zhǔn)品

鏈霉菌Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品胍基丁脲水解酶/凝集酶試劑盒三聚;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書(shū)
使用方法：
一、樣品DNA的制備
用自選方法提取細(xì)菌樣品DNA。注意：DNA純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品DNA，后面的PCR再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備O157:H7標(biāo)準(zhǔn)曲線（以10-10E6這6個(gè)10倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照，只提供沒(méi)有傳染性的、可以直接使用的DNA片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記6個(gè)離心管，分別為6，5，4，3，2和1號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入45 μL超純水（用帶芯槍頭，下同）。
3. 先將本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照用TE緩沖液或超純水10倍梯度稀釋到10E7拷貝/μL（注：請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至10E7拷貝/μL，建議每次稀釋10倍，梯度稀釋至10E7拷貝/μL）。
4. 在6號(hào)管中加入5 μL 10E7拷貝/μL的O157:H7陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘，得10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。
5. 換槍頭，從6號(hào)管中取5 μL溶液到5號(hào)管中，充分震蕩1分鐘，得10E5拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。
6. 換槍頭，從5號(hào)管中取5 μL溶液到4號(hào)管中，重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。
7. NC管中不加任何陽(yáng)性對(duì)照。
8. 從1-6號(hào)管中分別取5 μL和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量PCR（見(jiàn)下步），每個(gè)樣品做3次重復(fù)。PCR后得到每個(gè)陽(yáng)性對(duì)照稀釋樣品的熒光PCR Ct值，并以之為縱軸，以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。